您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)
會(huì)員.png)
9
在細(xì)胞培養(yǎng)中遇到培養(yǎng)液pH值變化太快，怎么辦
細(xì)胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等），使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)看重的就是無(wú)菌操作，無(wú)菌操作是細(xì)胞培養(yǎng)是否成功的關(guān)鍵點(diǎn)。凡是放入超凈臺(tái)中的不是一次性使用的物品事先都需要經(jīng)過(guò)高壓滅菌；不能進(jìn)行高壓處理的物品也需要經(jīng)過(guò)75%的乙醇消毒。包括酒精燈、吸管、移液器、試管架、培養(yǎng)皿、廢液缸等。
培養(yǎng)液pH值變化太快，怎么辦？
可能造成的原因：
1.CO2張力不對(duì)；
2.培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊；
3.NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖力不足；
4.培養(yǎng)液中鹽濃度不正確；
5.細(xì)菌、酵母或真菌污染。
解決方法：
1.按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度，2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5％到10％或者改用不依賴CO2培養(yǎng)液
2.松開瓶蓋1/4圈
3.加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度
4.在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液，在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液
5.丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌