ReadyAMP^®PCR直接擴(kuò)增技術(shù)在酵母菌中應(yīng)用

——無需處理、直接PCR

酵母作為單細(xì)胞真核生物，受限于細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，DNA提取非常困難。相較于細(xì)菌，溶菌酶無法工作，只能使用破壁酶。而破壁酶價格非常昂貴。所以目前實(shí)驗(yàn)室工作人員更多使用液氮研磨和玻璃珠研磨法，加速破壁。但是以上幾種處理方法均需要大量培養(yǎng)酵母菌，提取周期變長，實(shí)驗(yàn)操作樂趣下降。

我司開發(fā)的ReadyAMP^®快速酵母鑒定試劑盒可以避開以上難點(diǎn)。只要有真菌培養(yǎng)液或菌斑就可以直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增。該方法最大的特點(diǎn)如下：

1、簡單便捷、一步完成

2、檢測線低至10⁴個/mL酵母菌

3、檢測樣本豐富，例如對數(shù)生長期菌液、菌斑等

4、樣本需求量低，例如菌液1-3μL、菌斑1個

5、酵母菌100%檢出

6、難增殖菌種有效

案例A 四種酵母菌擴(kuò)增2個基因

1、釀酒酵母 2、啤酒酵母 3、假絲酵母 4、畢赤酵母

使用ReadyAMP^®酵母菌直接PCR擴(kuò)增試劑盒（貨號Nu-Y0101）直接擴(kuò)增四種酵母對數(shù)生長期增殖液，擴(kuò)增2個不同長度基因，分別為700-900bp（ITS）和2200bp（18S）。