熒光素酶報(bào)告基因是指以熒光素(luciferin)為底物來檢測(cè)螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報(bào)告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中，會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence)。

螢火蟲螢光素酶

通用和常見的報(bào)告基因是北美螢火蟲photinus pyralis的熒光素酶，該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度（體內(nèi)）甚至沒有毒性，可用于原核和真核細(xì)胞。

Amplite™熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒

圖1.在帶有NOVOstar讀板器（BMG Labtech）的白色96孔板中，使用Amplite™熒光素酶報(bào)告基因基因檢測(cè)試劑盒檢測(cè)螢光素酶劑量反應(yīng)。該試劑盒可在20min-5h的孵育時(shí)間內(nèi)檢測(cè)到低至0.1pg /孔的螢光素酶，而不會(huì)丟失信號(hào)強(qiáng)度。半衰期超過4小時(shí)。

Amplite™熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒（12518）使用無DTTzhuanli配方來定量活細(xì)胞和細(xì)胞提取物中的螢光素酶活性。該測(cè)定基于螢火蟲熒光素酶，螢火蟲熒光素酶是一種單體的61 kD酶，可催化熒光素的兩步氧化，在560 nm處產(chǎn)生光。

Amplite™熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒（12518）特點(diǎn)：

具有優(yōu)化的“混合讀取”測(cè)定規(guī)程，可與HTS液體處理儀器兼容

具有高靈敏度，可用于需要低檢測(cè)限的測(cè)定

具有用于研究基因調(diào)控和功能的快速，簡(jiǎn)單且均一的生物發(fā)光測(cè)定法

與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基的使用兼容

高斯熒光素酶

近年來，其他熒光素酶（例如高斯熒光素酶）的使用有所增加，因?yàn)檫@些報(bào)告基因較小，并且不需要ATP的存在。高斯熒光素酶是一種20 kD的蛋白質(zhì)，可通過氧氣催化腔腸素氧化，產(chǎn)生光。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達(dá)后可有效地從哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分泌出來。

Amplite™高斯熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定

圖2.用Amplite高斯熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定試劑盒和其他某品牌高斯熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定試劑盒（紅線）在96孔白板中使用NOVOstar讀板儀測(cè)量分泌的高斯熒光素酶培養(yǎng)基對(duì)比圖。

Amplite™高斯熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒使用專有的發(fā)光配方來定量細(xì)胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性。當(dāng)該試劑與高斯熒光素酶相互作用時(shí)，產(chǎn)生發(fā)光產(chǎn)物，該發(fā)光產(chǎn)物提供強(qiáng)發(fā)光。

Amplite高斯熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定試劑盒（AAT-12530）特點(diǎn)：

提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件

它們具有高靈敏度，可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行

半衰期為一小時(shí)的“輝光型”信號(hào)在大量檢測(cè)板之間提供一致的信號(hào)

與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基兼容

海腎熒光素酶

海腎螢光素酶是一種從海桑（Renilla reniformis）分離的36 kDa蛋白。與螢火蟲熒光素酶相比，海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素，產(chǎn)生480 nm的藍(lán)光。與螢火蟲螢光素酶類似，海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報(bào)告檢測(cè)。

Amplite™海腎熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定

Amplite™Renilla螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒提供了一種快速，靈敏的方法，可以使用專有的發(fā)光配方在基于細(xì)胞的檢測(cè)中檢海腎螢光素酶的活性，與海腎螢光素酶相互作用后，該試劑產(chǎn)生具有強(qiáng)光的產(chǎn)物。

Amplite™海腎熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒（12535）特點(diǎn)：

該測(cè)定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基兼容

該試劑盒可以測(cè)量野生型和合成hRluc基因的原始表達(dá)或基因表達(dá)

每個(gè)試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測(cè)所*的組分

圖3.用Amplite™Renilla熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒在白色的96孔板中用NOVOstar酶標(biāo)儀（BMG Labtech）測(cè)量了Renilla熒光素酶。

各類螢光素酶底物，輔因子和物理特性：