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近年來,利用稀土熒光配合物作為標記物的時間分辨熒光(TR-FRET)生化分析技術由于其具有靈敏度高,背景熒光干擾小等優(yōu)點在臨床免疫分析、核酸雜交分析和生物成像領域發(fā)揮著越來越廣泛的應用。
時間分辨熒光(TR-FRET)利用稀土元素中鑭系元素的*性質。在TRF中常用的鑭系元素是釤(Sm)、銪(Eu)、鋱(Tb)、鏑(Dy)。與傳統(tǒng)熒光基團相比,他們具有大的斯托克位移,和非常長的發(fā)射半衰期(從微妙到毫秒),這使它們在生物學熒光應用領域中日益重要。
通過直接激發(fā)使鑭系元素離子產(chǎn)生熒光是不容易的,因為這些離子很難吸收光子,鑭系元素必須首先與有機分子形成復合物,有機分子收集光子并通過分子內(nèi)非放射性過程轉移到鑭系元素上。稀土元素螯合物和穴狀配合物是能量收集裝置的典型代表,他們收集能量并轉移到鑭系元素離子上,后者則發(fā)出其特征性的長壽命熒光。
FRET 效應其實是熒光現(xiàn)象的一種延伸。它是利用了一種熒光物質發(fā)出的熒光,來激發(fā)另一種熒光物質,從而實現(xiàn)了熒光的“傳遞"。當然,這種效應的產(chǎn)生是需要一些特定條件的,其中之一便是要求兩種熒光物質在空間距離上足夠接近,通常認為在1-10nm范圍內(nèi)。
因此,F(xiàn)RET技術成為科研人員手中一把衡量分子間距離的“納米標尺,基于這種功能,FRET技術被廣泛應用于研究各類分子間的相互作用,在臨床免疫分析、核酸雜交分析和生物成像領域有著廣泛的應用。
知道了鑭系元素離子是FRET技術中非常重要的一環(huán),接下來就是這篇文章的“點睛之筆"氨基反應性的銪標記試劑盒。
氨基反應性的銪標記試劑盒,是艾美捷IVD級別熒光染料供應商Columbia在FRET技術中應用最為廣泛的鑭系元素離子——銪(Eu)離子標記工具。另外還有一個,是鏈霉親和素標記銪螯合物W-1024。
氨基反應性的銪標記試劑盒可以給任何帶游離氨基的物質標記上銪離子,以標記IgG為例,一個試劑盒可用于標記高達1.2mg IgG,可得到5-9Eu / IgG。
以上,就是今天要介紹的銪(Eu)離子標記工具——氨基反應性的銪標記試劑盒。
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