背景：

前列腺素E2是多種細(xì)胞內(nèi)花生四烯酸的主要代謝產(chǎn)物，象類(lèi)花生酸一樣，不能在胞內(nèi)儲(chǔ)存.當(dāng)細(xì)胞被激活或者提供自由花生四烯酸后，PEG2才能被合成，并釋放到胞外；在體內(nèi)，通過(guò)15-脫氫酶途徑，PEG2能快速轉(zhuǎn)變成為無(wú)活性的13,14-dihydro-15-keto PGE2.PEG2的半衰期為30秒，在正常血液中的含量為3-12pg/ml.

艾美捷 開(kāi)曼生物 前列腺素E2快速檢測(cè)ELISA試劑盒檢測(cè)原理：

本試驗(yàn)基于PGE2和PGE2-乙酰膽堿酯酶（AChE）結(jié)合物（PGE2示蹤劑）之間的競(jìng)爭(zhēng)，以獲得*的PGE2單克隆抗體。由于PGE2示蹤劑的濃度在PGE2濃度變化時(shí)保持恒定，因此能夠結(jié)合到PGE2單克隆抗體的PGE2示蹤劑的量將與孔中的PGE2濃度成反比。該抗體-PGE2復(fù)合物與先前連接到微孔的山羊多克隆抗小鼠IgG結(jié)合。清洗培養(yǎng)板以去除任何未結(jié)合的試劑，然后將Ellman試劑（含有乙酰膽堿酯酶基質(zhì)）添加到孔中。該酶反應(yīng)產(chǎn)物具有明顯的黃色，并在412 nm處強(qiáng)烈吸收。通過(guò)分光光度法測(cè)定的該顏色的強(qiáng)度與結(jié)合到孔中的PGE2示蹤劑的量成正比，該示蹤劑的量與孵化期間孔中存在的游離PGE2的量成反比；該過(guò)程的示意圖如下圖所示。

圖：乙酰膽堿酯酶的示意圖

艾美捷 開(kāi)曼生物 前列腺素E2快速檢測(cè)ELISA試劑盒特點(diǎn)：

已經(jīng)證明能在尿液，血液或者培養(yǎng)基樣本中使用.一般情況下，尿液或者培養(yǎng)基樣本需稀釋后，直接用于試劑盒檢測(cè)；對(duì)于血液樣本，需要預(yù)先純化，因?yàn)?span style="font-family: Calibri;">PEG2在血液樣本中會(huì)很快代謝掉.

艾美捷 開(kāi)曼生物 前列腺素E2快速檢測(cè)ELISA試劑盒檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：

用1.0 ml ELISA緩沖液重新配制PGE2 Express ELISA標(biāo)準(zhǔn)品內(nèi)容物。該溶液（散裝標(biāo)準(zhǔn)品）的濃度將為10納克/毫升。儲(chǔ)存在4°C下；該標(biāo)準(zhǔn)將穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)四周。

注：如果測(cè)定未用ELISA緩沖液稀釋至少10倍的培養(yǎng)基樣品，應(yīng)使用培養(yǎng)基代替ELISA緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和樣品。

制備用于ELISA的標(biāo)準(zhǔn)品：獲得八個(gè)干凈的試管，并將其編號(hào)為#1到#8。等分800µl ELISA緩沖液至試管#1和500µl ELISA緩沖液至試管#2-8。將200微升散裝標(biāo)準(zhǔn)品（10納克/毫升）轉(zhuǎn)移到試管#1中，并*混合。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上的個(gè)點(diǎn)，該標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為2納克/毫升（2000微克/毫升）。通過(guò)從管#1中去除500µl并放置在管#2中連續(xù)稀釋標(biāo)準(zhǔn)溶液；*混合。接下來(lái)，從管#2中取出500µl，放入管#3中；*混合。對(duì)管道4-8重復(fù)此過(guò)程。這些稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的儲(chǔ)存時(shí)間不應(yīng)超過(guò)24小時(shí)。