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武漢艾美捷科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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Bertin Instruments/艾美捷典型的RCGRP(人)ELISA試劑盒檢測(cè)原理&標(biāo)曲參考

時(shí)間:2024/10/15閱讀:128
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降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)是一種強(qiáng)效的血管擴(kuò)張劑,同時(shí)也引發(fā)多種其他生物效應(yīng)。

在正常人群中,CGRP的平均血漿水平報(bào)告為0.8 pmol/L71 pmol/L3 pg/mL269 pg/mL)。在進(jìn)行血液透析、懷孕、哮喘加重以及髓樣甲狀腺癌病例中,觀察到了循環(huán)CGRP水平的增加。

酶免疫測(cè)定(EIA)是一種檢測(cè)和定量樣本中抗原(蛋白質(zhì)、激素等)或抗體的技術(shù)。它依賴于抗體結(jié)合特定抗原的能力。

 

艾美捷Bertin Instruments-RCGRP(人)ELISA試劑盒A05481檢測(cè)原理:

酶聯(lián)免疫分析(EIA/ELISA)基于一種夾心技術(shù)。提供的試劑盒孔板被涂覆有特異性單克隆抗體,以捕捉降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)。引入孔板中的CGRP(標(biāo)準(zhǔn)品或樣本)與涂覆在板上的單克隆抗體結(jié)合,然后通過(guò)特異性針對(duì)CGRP的乙酰膽堿酯酶(AChE-Fab’偶聯(lián)物進(jìn)行檢測(cè)。

這兩種抗體通過(guò)結(jié)合在CGRP的不同表位上形成一個(gè)夾心結(jié)構(gòu)。夾心結(jié)構(gòu)固定在孔板上,剩余的試劑被洗去。CGRP的濃度通過(guò)測(cè)量固定標(biāo)記物的酶活性來(lái)確定,使用Ellman試劑。AChE標(biāo)記物與Ellman試劑反應(yīng)生成一種在405 nm414 nm處強(qiáng)烈吸收的黃色化合物。

顏色的強(qiáng)度通過(guò)分光光度法進(jìn)行測(cè)定,與免疫反應(yīng)過(guò)程中孔內(nèi)存在的CGRP的量成正比。

 

所需材料和設(shè)備:

除了標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備外,還需要以下材料:

 

樣本準(zhǔn)備(并非所有樣本類(lèi)型都需要):

C-18反相色譜柱或Oasis® HLB提取柱

甲醇

醋酸

 

檢測(cè)所需:

精密微量移液器(201000 μL

分光光度計(jì)讀板儀(405 nm414 nm濾光片)

微孔板洗滌機(jī)(或洗滌瓶)

搖床微孔板

多通道移液器及一次性吸頭(30-300 µL

UltraPure水 #A07001.1L

聚丙烯管

用于制備所有ELISA試劑和緩沖液的水必須是UltraPure水(去離子水且不含有機(jī)污染物痕跡)。

請(qǐng)勿使用蒸餾水、HPLC級(jí)水或滅菌水。

 

典型的CGRP(人)標(biāo)準(zhǔn)曲線:

61.png

 


 

艾美捷科技是Bertin Instruments的特約合作代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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