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肌酐(Cr)檢測(cè)試劑盒(去蛋白終點(diǎn)微板法)
閱讀:917 發(fā)布時(shí)間:2022-3-2
肌酐(Cr)檢測(cè)試劑盒(去蛋白終點(diǎn)微板法)
一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
肌酉酐(creatinine ,Cr)是人體或動(dòng)物肌肉內(nèi)代謝的產(chǎn)物,每20g肌肉代謝可產(chǎn)生約1mg肌酐,由腎小球?yàn)V過(guò)排出體外,外源性肌酐是肉類食物在體內(nèi)代謝后的產(chǎn)物,內(nèi)源性肌酐是體內(nèi)肌肉組織代謝的產(chǎn)物。
雅吉生物肌酐(Cr)檢測(cè)試劑盒(去蛋白終點(diǎn)比色法)檢測(cè)原理是肌酐與鹽發(fā)生Jaffe反應(yīng),生成橘紅色的苦肌酐復(fù)合物,該復(fù)合物生成量與肌酐含量呈正比,通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定510nm 處吸光度,可用于檢測(cè)人體、動(dòng)物的血漿、血清、尿液樣品中肌酐含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
二、產(chǎn)品組成:
名稱規(guī)格 | 50T | 存儲(chǔ) |
試劑(A):肌酐標(biāo)準(zhǔn)(10mmol/L) | 1ml | 4℃避光 |
試劑(B):肌酐標(biāo)準(zhǔn)稀釋液 | 10ml | RT |
試劑(C):蛋白沉淀液 | 50ml | RT避光 |
試劑(D):Cr顯色液 | 5.5ml | RT |
試劑(E): Cr Assay Buffer | 5.5ml | RT |
使用說(shuō)明書(shū) | 一份 |
肌酐(Cr)檢測(cè)試劑盒(去蛋白終點(diǎn)微板法)
三、自備材料:
1、1.5ml離心管、96孔板
2、離心機(jī)、酶標(biāo)儀
3、蒸餾水
四、操作步驟(僅供參考):
1、準(zhǔn)備樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備,-20℃凍存。取血清或血漿0.05ml,加入蛋白沉淀液0.45ml,充分混勻,靜置5min后3500r/min離心10min,取上清液,4℃保存待用;尿液中肌酐含量較高,應(yīng)先用蒸餾水作50~200倍稀釋后再測(cè)。
2、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液︰取肌酐標(biāo)準(zhǔn)(10mmol/L),按肌酐標(biāo)準(zhǔn)(10mmol/L)∶肌酐標(biāo)準(zhǔn)稀釋液=1:99的比例混合,使?jié)舛冗_(dá)到100μmol/L,即為標(biāo)準(zhǔn)品工作液-肌酐標(biāo)準(zhǔn)(100μmol/L);4℃保存,1周有效。
3、Cr加樣:按照下表設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、測(cè)定孔,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的Cr濃度過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。
肌酐(Cr)檢測(cè)試劑盒(去蛋白終點(diǎn)微板法)
加入物(μl) | 空白孔 | 標(biāo)準(zhǔn)孔 | 測(cè)定孔 |
蒸餾水 | 150 | — | — |
肌酐標(biāo)準(zhǔn)(100μmol/L) | — | 150 | — |
血清無(wú)蛋白濾液或稀釋尿液 | — | — | 150 |
Cr顯色液 | 50 | 50 | 50 |
Cr Assay Buffer | 50 | 50 | 50 |
4、Cr檢測(cè)︰充分混勻,室溫放置15min,酶標(biāo)儀檢測(cè)510nm吸光度,空白孔調(diào)零,讀取各孔吸光度,分別為A標(biāo)準(zhǔn)、A測(cè)定。
計(jì)算:
血清(漿)肌西酐(μmol/L)=(A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn))×100
尿液肌西(μmol/d)=(A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn))×100×N×24h尿量(L)
式中∶
A測(cè)定=測(cè)定孔的吸光度
A標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)孔的吸光度
N=尿液稀釋倍數(shù)
內(nèi)生肌酐清除率值(L/24h)=尿液肌酐(μmol/L)/血清肌酐(μmol/L)×24h尿量(L)
校正的內(nèi)生肌酐清除率值(L/24h)=內(nèi)生肌酐清除率值×1.73/體表面積(m2)
注︰以正常人24h內(nèi)生肌酐清除率值為128L(即24h 內(nèi)有128L血液中的肌酐通過(guò)腎臟被清除)作為*,則內(nèi)生肌酐清除率(%)=校正的內(nèi)生肌酐清除率值×100/128(或0.78)
單位換算:d=24h
參考區(qū)間:
健康成年男性血清肌酐 | 44~133μmol/L(0.5~1.5mg/dl) |
健康成年女性血清肌酐 | 70~106μmol/L(0.8~1.2mg/dl) |
健康成年男性肌斷清除率值 | 105士20ml/min |
健康成年女性肌酐清除率值 | 95士20ml/min |
注意事項(xiàng):
1、測(cè)定各孔時(shí),各孔溫度均需達(dá)到室溫,否則影響結(jié)果。
2、輕度溶血樣本對(duì)肌酐測(cè)定無(wú)影響﹔尿液樣品中肌酐含量較高,樣品需做50~200倍稀釋,如果顯色后吸光度仍較高,還需將尿液繼續(xù)擴(kuò)大稀釋倍數(shù),重新檢測(cè)。
3、呈色后標(biāo)準(zhǔn)管吸光度較穩(wěn)定,但測(cè)定管吸光度隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加﹔另外肌酐濃度越高,吸光度變化越快,因此加入顯色劑后30min內(nèi)完成檢測(cè)為宜。
4、以標(biāo)準(zhǔn)品做梯度實(shí)驗(yàn),200μmol/L以下濃度呈不同程度的黃色-橙黃色,超過(guò)200μmol/L顏色逐漸加深,呈橘紅色,到1000μmol/L呈深橘紅色;用酶標(biāo)儀測(cè)定100μmol/L,吸光度值在0.3左右。
有效期:12個(gè)月有效。
附錄∶標(biāo)準(zhǔn)曲線制作:在室溫條件下按說(shuō)明書(shū)操作,用酶標(biāo)儀505nm對(duì)標(biāo)準(zhǔn)梯度進(jìn)行吸光度的測(cè)定,其數(shù)值及標(biāo)準(zhǔn)曲線如下(僅供參考)︰
Cr(μm) | 0 | 20 | 50 | 100 | 150 | 200 | 400 | 700 | 1000 |
吸光度 | 0.059 | 0.107 | 0.183 | 0.303 | 0.438 | 0.544 | 1.033 | 1.731 | 2.454 |
肌酐(Cr)檢測(cè)試劑盒(去蛋白終點(diǎn)微板法)