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組織活性氧(ROS)檢測試劑盒（DHE）簡介
閱讀：4360 發(fā)布時間：2022-8-15
組織活性氧(ROS)檢測試劑盒（DHE）
一、產(chǎn)品簡介：
組織活性氧檢測試劑盒是一種利用熒光探針DHE進行組織活性氧檢測的試劑盒。本試劑盒中的DHE ROS探針為紅色熒光的活性氧探針，具有510/610nm的最大激發(fā)/發(fā)射波長。DHE ROS探針在組織中活性氧存在的條件下，被氧化生成紅色熒光物質(zhì)，紅色熒光強度與組織內(nèi)活性氧水平成正比，檢測 DHE 產(chǎn)物的熒光強度就可以知道組織內(nèi)活性氧的水平。 在激發(fā)波長510nm，發(fā)射波長610nm附近，使用熒光分光光度計、熒光酶標儀、等檢測DHE產(chǎn)物熒光，從而測定組織內(nèi)活性氧水平?；钚匝?Reactive oxygen species, ROS)包括過氧化氫（H2O2，Hydrogen peroxide）、羥基自由基（•OH，Hydroxyl radical）、單線態(tài)氧（1O2，Singlet oxygen）、 一氧化氮（NO，Nitric oxide）、超氧陰離子(•O2-，Superoxide anion)、過氧化自由基(ROO•，Peroxylradical)、過氧羥自由基（HOO•，hydroperoxyl）及其下游產(chǎn)物過氧化物過氧亞硝基陰離子
（ONOO-，Peroxynitrite anion）、ClO-和羥化物等，參與細胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程。
活性氧（reactive oxygen species，ROS）的產(chǎn)生主要是氧化磷酸化的結(jié)果，在呼吸鏈中，在某些位點會有“泄露”的電子直接和氧氣或和其他電子受體反應，在酶或非酶作用下引發(fā) 一系列反應生成不同種類的活性氧：“泄露”的電子最初和氧氣反應生成超氧陰離子自由基（O2•-）。超氧陰離子遇水生成 H2O2，同時過氧化氫也可由氧氣在單 胺氧化酶（monoamine oxidase，MAO）的作用下生成，生成的過氧化氫在髓過氧化物酶（myeloperoxidase, MPO）的催化下與 Cl-反應可生成ClO-，在鐵或銅離子的催化下發(fā)生Fenton反應生成OH•，超氧陰離子遇氮氧化物反應生成ONOO-。這些生成的高氧化活性的物質(zhì)統(tǒng)稱為活性氧。
適用：新鮮組織， 一般最好使用新鮮組織樣本檢測活性氧，反映的是組織當時的活性氧狀態(tài)。凍存的組織樣本的ROS在長期凍存過程中會損失掉，有條件的話就使用新鮮樣本，不建議使用凍存的組織樣本。已經(jīng)凍存的組織樣本中殘余的ROS也可以用本試劑盒檢測。
二、產(chǎn)品組成：
| 名稱規(guī)格 | 100T | 200T |
| 勻漿緩沖液 A | 100 ml | 2*100 ml |
| DHE 活性氧探針 | 200 μl | 2*200 μl |
| 說明書 | 一份 | |
三、自備材料：
1、熒光分光光度計或熒光酶標儀，離心機，移液器，冰箱，冰盒
2、PBS 緩沖液或者 HBSS
3、離心管，吸頭，一次性手套，熒光檢測專用黑色 96孔板
組織活性氧(ROS)檢測試劑盒（DHE）
四、操作步驟(僅供參考)：
1、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開蓋時液體灑落。
2、熒光探針標記后，一定要洗凈殘余的未進入細胞內(nèi)的探針，否則會導致背景較高。
3、探針標記完畢并洗凈殘余探針后，可以進行激發(fā)波長的掃描和發(fā)射波長的掃描，以確認探針的標記情況是否正常。
4、盡量縮短探針標記后到測定所用的時間，以減少各種可能的誤差。
5、原位檢測必須使用熒光檢測專用的黑色透明底96孔細胞培養(yǎng)板。
6、操作步驟僅供參考，請根據(jù)實際樣本情況調(diào)整。
五、注意事項：
1、正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
7、避免反復凍融。
8、可以根據(jù)需要分裝后凍存。
9、探針為DMSO溶液，在 2-8℃時是固體狀態(tài)，冬季氣溫較低時為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
六、有效期：-20 ℃避光有效期為一年
組織活性氧(ROS)檢測試劑盒（DHE）