国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊(cè)

當(dāng)前位置:
上海雅吉生物科技有限公司>資料下載>胰島素受體與[125I]胰島素的交聯(lián)實(shí)驗(yàn)

資料下載

胰島素受體與[125I]胰島素的交聯(lián)實(shí)驗(yàn)

閱讀:265          發(fā)布時(shí)間:2018-12-28
提 供 商 上海雅吉生物科技有限公司 資料大小 662.8KB
資料圖片 下載次數(shù) 40次
資料類型 PNG 圖片 瀏覽次數(shù) 265次
免費(fèi)下載 點(diǎn)擊下載    

實(shí)驗(yàn)方法原理    
試劑、試劑盒    純化的鼠肝細(xì)胞質(zhì)膜部分純化的胰島素受體純化的胰島素受體[125I] 胰島素豬胰島素雙琥珀酰亞胺酰辛二酸二甲亞砜NH4Cl甘油SDS-PAGE 樣品緩沖液
儀器、耗材    蛋白質(zhì)凝膠電泳裝置干膠器
實(shí)驗(yàn)步驟    
材料與設(shè)備

純化的鼠肝細(xì)胞質(zhì)膜(見(jiàn)本單元實(shí)驗(yàn) 1)

部分純化的胰島素受體,得自 WGA-瓊脂糖柱層析(見(jiàn)本單元實(shí)驗(yàn) 3)

純化的胰島素受體,得自胰島素瓊脂糖柱層析(見(jiàn)本單元實(shí)驗(yàn) 4)

[125I] 胰島素(受體級(jí))(DuPont NEN NEX 196)

豬胰島素(17.5umol/L)(如,Sigma Chemical Co.13505)

雙琥珀酰亞胺酰辛二酸(Pierce Chemical Co.21555)

二甲亞砜(DMSO)

NH4Cl(1mol/L)

甘油(10%;v/v)

蛋白質(zhì)凝膠電泳裝置(BioRad Laboratories 或 Hoefer Scientific Instruments)

干膠器 (Bio-Rad Laboratories 或 Hoefer Scientific Instruments)

試劑

SDS-PAGE 樣品緩沖液(5x)

(配方,見(jiàn)“試劑的配制”,pp.234~240)

操作程序

1)建立如下反應(yīng)體系:

 

2) 反應(yīng)混合物于室溫孵育 2 h。

3) 溶雙琥珀酰亞胺酰辛二酸于 DMSO 中,使終濃度為 10 mmol/L。

4) 每管加入 6ul 10 mmol/L 雙琥珀酰亞胺酰辛二酸,室溫孵育 1 min。

5) 加1ul 1mol/L NH4Cl 終止反應(yīng)。

6) 加 15ul 5xSDS-PAGE 樣品緩沖液。

7) 樣品煮沸 5 min。

8) 加樣至 7.5%SDS-聚丙烯酰胺凝膠上。170V 電壓下電泳,至染料前沿跑出凝膠。(關(guān)于 SDS-PAGE 的詳細(xì)資料,見(jiàn)附錄 5)

9) 將凝膠置 10% 甘油中孵育后,在干膠器上干燥。
注:蛋白質(zhì)也可轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上,如本單元實(shí)驗(yàn) 6 所述。

10)用放射自顯影法鑒定親和標(biāo)記的胰島素受體。

結(jié)果

交聯(lián)實(shí)驗(yàn)的典型結(jié)果如圖 4-6 所示。

收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

對(duì)比框

產(chǎn)品對(duì)比 產(chǎn)品對(duì)比 聯(lián)系電話 二維碼 意見(jiàn)反饋 在線交流

掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪
021-34661276
在線留言
怀来县| 张家口市| 西畴县| 梧州市| 儋州市| 鲁山县| 金寨县| 罗山县| 昔阳县| 迭部县| 都昌县| 绥滨县| 桃江县| 木里| 舒兰市| 临湘市| 梅州市| 凤城市| 长泰县| 石棉县| 宜州市| 财经| 西乌珠穆沁旗| 广饶县| 赣州市| 阜新市| 隆尧县| 玛纳斯县| 泸水县| 桃江县| 法库县| 丁青县| 日照市| 西城区| 蓝山县| 邯郸县| 遂宁市| 手游| 南靖县| 册亨县| 大连市|