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骨髓細胞單細胞懸液的制備
閱讀：587 發(fā)布時間：2019-1-2骨髓細胞單細胞懸液的制備
實驗材料骨髓液
試劑、試劑盒肝素抗凝劑PBS
實驗步驟
1. 無菌抽取骨髓液 0.5 ml。
2. 將骨髓標(biāo)本滴入含 1000 U/ml 肝素抗凝劑的 1 ml PBS 液中。
3. 再加入 PBS 液稀釋至 10 mI。
4. 用吸管吸取 5 ml 稀釋骨髓液徐徐加入盛有 4 ml 的人類淋巴細胞分離液液面之上。
5. 在以上條件下，骨髓有核細胞分層在 PBS 人類淋巴細胞分離液之間形成的界面上。
6. 吸取有核細胞層，加入到 10 ml PBS 液中，混勻。
7. 以 1000 r/min 離心 5 min，棄上清；收集骨髓細胞，加固定液或置低溫冰箱備用。
收起
注意事項
1. 抽骨髓液時，先將注射器針頭、針筒、針?biāo)ㄓ酶嗡亟?，抽取時力量適中。
2. 在吸取淋巴細胞層時盡量少吸分離液，吸取量應(yīng)掌握在 300 μl 左右，這樣有利于洗去多余的分離液。
3. 溶紅細胞的方法：以等量的蒸餾水加入到沉淀中，輕輕搖動片刻，見粉紅色出現(xiàn)，立即加入大量生理鹽水，混勻，離心，去除上清即可。
1600SiHa人子宮頸鱗癌細胞DMEM+10% FBS
1500CaSki人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細胞/人宮頸癌上皮細胞DMEM+10% FBS
1500MDA-MB-231人乳腺癌細胞DMEM+10% FBS
1500SPC-A-1人肺癌細胞RPMI-1640+10% FBS
1500Eca-109人食管癌細胞RPMI-1640+10% FBS
1600THP-1人髓系白血病單核細胞RPMI-1640+10% FBS
1600K562人慢性骨髓性白血病細胞RPMI-1640+10% FBS
1500PC-3人前列腺癌細胞F-12K+10% FBS/DMEM +10% FBS
1500A549人非小細胞肺癌細胞F-12K+10% FBS
1800NCM460人正常結(jié)腸上皮細胞RPMI-1640+10% FBS
1500HCT-15人結(jié)腸癌細胞RPMI-1640+10% FBS
1600COLO 320DM人結(jié)直腸腺癌細胞RPMI-1640+10% FBS
1500COLO 320人結(jié)腸癌細胞RPMI-1640+10% FBS
1600COLO 201人結(jié)直腸腺癌細胞RPMI-1640+10% FBS
1600Caco-2人結(jié)直腸腺癌細胞DMEM+20% FBS
1800BEAS-2B人支氣管上皮細胞DMEM+10% FBS
1600Raji人Burkitt's淋巴瘤細胞RPMI-1640+10% FBS
1600Daudi人Burkitt's淋巴瘤細胞RPMI-1640+10% FBS
1600RAMOS人B淋巴細胞瘤細胞RPMI-1640+10% FBS
1800T84人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞DMEM/F12+10% FBS
1800c666-1人鼻咽癌細胞RPMI-1640+10% FBS
2000HepG2.2.15表達HBV病毒的人肝癌細胞MEM+10% FBS+0.4mg/ml G418
1600T47D人乳腺導(dǎo)管癌細胞RPMI-1640+10% FBS
1600SK-BR-3人乳腺癌細胞DMEM（高糖）+10% FBS
1500HT-29人結(jié)腸癌細胞McCoy’s +10% FBS
1500PLC/PRF/5人肝癌亞力山大細胞DMEM+10% FBS
1500L-02（HL-7702)人正常肝細胞DMEM+10% FBS
1500SGC-7901人胃癌細胞RPMI-1640+10% FBS
1500786-O人腎透明細胞癌細胞RPMI-1640+10% FBS
1500ACHN人腎癌細胞DMEM+10% FBS
1500SK-OV-3人卵巢癌細胞McCoy’s +10% FBS
1500769-P人腎細胞腺癌細胞RPMI-1640 + 10% FBS
1500NCI-H1299人非小細胞肺癌細胞RPMI-1640+10% FBS
1500MKN-28（MKN-74)人胃癌高轉(zhuǎn)移細胞RPMI-1640+10% FBS