大鼠骨原代細胞

大鼠骨細胞分離自骨組織；骨組織的細胞成分包括骨原細胞、成骨細胞、骨細胞和破骨細胞。只有骨細胞存在于骨組織內，其他三種細胞均位于骨組織的邊緣。骨細胞（Osteocyte）是人體骨骼中最主要的細胞成分。在成年人骨骼中，骨細胞占細胞總數(shù)量的90%～95%，大約是成骨細胞數(shù)量的20倍。骨細胞生長在骨骼內部的骨基質中。骨細胞的細胞體呈梭形或類圓形，位于基質構成的骨陷窩內。與神經細胞類似，每個骨細胞具有大量向外延伸的突觸，而這些突觸均位于由骨基質構成的骨小管結構中。通過這些突觸，骨細胞能夠與骨表面的細胞、周圍其它的骨細胞進行“交流"。普遍認為，骨細胞起源于成骨細胞。在骨形成的終末階段，成骨細胞將可能有3種不同的歸宿：分化成為骨細胞、轉移至骨表面成為暫不活動的成骨細胞、進入程序死亡過程（凋亡）。骨細胞為扁橢圓形多突起的細胞，核亦扁圓、染色深。胞質弱嗜堿性。電鏡下，胞質內有少量溶酶體、線粒體和粗面內質網(wǎng)，高爾基復合體亦不發(fā)達。骨細胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內。相鄰骨細胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質中，骨細胞胞體所占據(jù)的橢圓形小腔，稱為骨陷窩，其突起所在的空間稱骨小管。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連。骨陷窩和骨小管內均含有組織液，骨細胞從中獲得養(yǎng)分。

產品名稱：大鼠骨細胞

組織來源：骨組織

產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠骨采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠骨經骨鈣素免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

小鼠β內啡肽受體(β-EPR)ELISA 試劑盒

Human vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 人B6(VB6)試劑盒

HumanCollagenaseTypeIIELISAKit 人膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanc-fos試劑盒人c-fos試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉基因玉米MON863品系基因定量試劑盒20次

Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit人絲/蘇蛋酸酶(STK)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒 ，英文名： MMP-9 ELISA Kit

Human apoptosis signal regulating kinase I (ASK-1) ELISA Kit 人凋亡信號調節(jié)激酶I(ASK-1)試劑盒

MonkeyIerferonγ,IFN-γELISAKit 猴γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGF-6(Humanbasicfibroblastgrowthfactor6)ELISAKit人堿性成纖維細胞生長因子6

細菌乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次

RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit兔子白介素3(IL-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人阻抑素(PHB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human PHB (Prohibitin) ELISA Kit

人隱花色素1(CRY1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit

人優(yōu)球蛋白(EL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit

人信號素4D(SEMA4D)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human SEMA4D (Semaphorin 4D) ELISA Kit

IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標簽) Protein

Ⅹ(F10)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor X (F10)

EFNA4重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白  Protein

ALOX5AP Protein Human 重組人 ALOX5AP / FLAP 蛋白 (His 標簽)

HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)

C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細胞)  人支氣管平滑肌細胞HBSMC  MRC-5(人胚肺成纖維細胞 )     HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 鴨原代胚胎成纖維細胞 狗原代皮下微血管內皮細胞

大鼠骨原代細胞ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1 0.5mgECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內皮素轉化酶1抗原

ALPI Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPI 蛋白

CD226重組大鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白  Protein

MSR1 Protein Mouse 重組小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 蛋白 (His 標簽)

CDC42BPB重組人 CDC42BPB 蛋白 (His & GST 標簽) Protein