化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞
兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肝動(dòng)脈組織；在胚胎期，肝臟有3條動(dòng)脈供血，分別來(lái)源于胃左動(dòng)脈、腹腔動(dòng)脈和腸系膜上動(dòng)脈，這3條動(dòng)脈分別肝臟的不同部位。出生后，一般保留一條動(dòng)脈，大部分為起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈，由其分出左、右肝動(dòng)脈左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動(dòng)脈的動(dòng)脈或起源于腸系膜上動(dòng)脈的動(dòng)脈。但也有2條動(dòng)脈并存的情況，如起源于腹腔動(dòng)脈和起源于胃左動(dòng)脈（25%），起源于腹腔動(dòng)脈和起源于腸系臘上動(dòng)脈（10%），而起源于胃左動(dòng)脈和起源于腸系膜上動(dòng)脈的2條動(dòng)脈同時(shí)存在的情況比較少見。此外，還有5%像胚胎期一樣，3條動(dòng)脈同時(shí)存在。這種起源于腹腔動(dòng)脈以外的肝動(dòng)脈稱為迷走肝動(dòng)脈，如果肝臟沒有起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈供血時(shí)，此種異位起源的肝動(dòng)脈稱替代動(dòng)脈，如果在常見肝動(dòng)脈類型外，還有一支這種異位起始的動(dòng)脈肝臟的一部分血流，這種肝動(dòng)脈稱副肝動(dòng)脈。肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是襯于肝動(dòng)脈內(nèi)表面的單層扁平上皮，在炎癥時(shí)高表達(dá)黏附分子，與血流中白細(xì)胞表面黏附分子相互作用，從而介導(dǎo)白細(xì)胞穿越血管壁，亦屬一類非專職抗原提呈細(xì)胞。它們吞噬異物、細(xì)菌、壞死和衰老的組織，還參與集體免疫活動(dòng)，包括：①血管收縮及血管舒張，從而控制血壓；②凝血（血栓形成及纖維蛋白溶解）；③動(dòng)脈硬化；④血管生成；⑤炎癥及腫脹（浮腫）；⑥內(nèi)皮細(xì)胞亦控制一些物質(zhì)，如白血球進(jìn)出血管。
英文名稱 | Rabbit Hepatic Artery Endothelial Cells | 組織來(lái)源 | 肝動(dòng)脈 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X8348 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源：肝動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮采用混合酶消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
小鼠母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] | Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) 0酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit 人0酯酶Cγ鏈 96T | Anti-Moesin/FITC 熒光素標(biāo)記膜突蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Thrombospondin 2 血小板反應(yīng)蛋白2/敏感蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml | AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HAS2： 透明質(zhì)酸合成酶2抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh Cathelicidin 抗菌肽CAMP抗體 規(guī)格 0.1ml |
phospho-FOXO4 (Thr451)： 0酸化叉頭蛋白4抗體 0.1ml | TSH ELISA Kit 大鼠促甲狀腺素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
EPHA2 Others Human 人 EphA2 (aa 585-976) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A 人膀胱上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人急性早幼粒白血病細(xì)胞;HL-60 | PPP3R1 Others Human 人 PPP3R1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
HA Others H13N8 甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
LYPD3 Others Mouse 小鼠 LYPD3 / MIG-C4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | COCH Others Human 人 COCH / Cochlin ( isoform short ) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系 | 兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
KU812(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝 |
人上皮細(xì)胞;MCF-10A | 非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4- 畸胎瘤細(xì)胞，F9細(xì)胞 BEL-7404(肝癌細(xì)胞) |
CD63 Others Sus scrofa (Pig) 野豬 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Anti-Rad52/FITC 熒光素標(biāo)記Rad52抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
osteopontin： 骨橋蛋白抗體(分泌型0蛋白1) 0.1ml | CD40 Others Human 人 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
SorLA/LRP9： 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白9抗體 0.2ml | phospho-CDC27 (Thr244)： 0酸化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml | EPHA2 Others Human 人 EphA2 (aa 585-976) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
化工儀器網(wǎng)