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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的小鼠骨外膜采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的小鼠骨外膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠骨外膜原代細胞 | 組織來源 | 骨 |
英文名稱 | Mouse Periosteum Cells | 貨號 | YS-01X8499 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠骨外膜細胞分離自骨外膜組織；骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質(zhì)外面包著的那層膜；在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有一種能夠生成骨的細胞，稱為成骨細胞，這種細胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞，稱為破骨細胞。這兩種細胞作用相反又相互依據(jù)。成骨細胞像建筑工人，不停地生成新的骨組織，破骨細胞則像維修工人，不停地清除老化、死亡、破碎的骨結(jié)構(gòu)，并且還負責拆除“違章建筑"，就是除去不需要的多余的骨組織，從而使骨的整體結(jié)構(gòu)更符合生物力學的需要。正常情況下，兩種細胞之間處于動態(tài)的平衡之中，完成骨的生長發(fā)育的新陳代謝。骨折之后，成骨細胞首先啟動，從而促使新骨痂的生成，即骨折的愈合。但是，股痂只是恢復了骨的連續(xù)性，往往不符合生物力學的需要，改建塑形的過程則必須有破骨細胞的參與才能完成。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠骨外膜細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B 小鼠L6565白血病克隆細胞系，L6565細胞 RTG細胞，鮭魚胚胎細胞 | 過敏毒素C3受體/補體C3受體抗體 |
RNA結(jié)合泛素連接酶DZIP3抗體 | 細胞間粘附分子4抗體 |
0酯酶Cβ2抗體 | 蛋白酪激酶JAK-3抗體 |
鞘脂激活蛋白3抗體 | 葡糖抗體 |
鋅指蛋白851抗體 | 基質(zhì)金屬蛋白酶-2抗體 |
人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2 | CM-R080大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL |
C3H/An小鼠結(jié)締組織細胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 Mouse |
平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-prf | 豬腎細胞;PK(15) |
雜交瘤(B類);C3110D2B2 | CL-0226SW626(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
TOV-112D細胞，人上皮性卵巢癌細胞 人腎小管近段上皮細胞,HK-2細胞 子宮內(nèi)膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 小鼠骨外膜原代細胞蛋白酪激酶JAK-3抗體 |
狗腎惡性組織細胞增生癥細胞;DH82 | SK-N-MC細胞，上皮瘤細胞 鼠骨髓瘤細胞,P3/NS1/1-Ag4-1細胞 人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901] |
T-47D(人管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0903 |
BxPC-3 人原位胰腺腺癌細胞 | 髓鞘堿性蛋白/0脂堿性蛋白抗體 |
風疹病毒糖蛋白抗體 | 人生發(fā)基質(zhì)細胞總RNAHHGMC NA |
吲哚乙酸/植物生長素單克隆抗體 | 半胺酸蛋白酶蛋白-13抗體 |
跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道抗體 | 人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2 |
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