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詳細介紹
操作規(guī)程：
1、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱：Hoechst33258染色試劑盒
英文名稱：Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格：100T
發(fā)貨周期：1～3天
細胞凋亡時產(chǎn)生顯著的變化是染色體固縮，DNA 裂解使細胞核形態(tài)產(chǎn)發(fā)生變化。本試劑盒提供的熒光染料Hoechst 33258 是一種無毒、水溶性雙苯咪唑類化合物，可作為熒光探針與DNA 分子結合。 在凋亡細胞中，細胞膜對Hoechst 33258 的攝取增高，并且由于染色體高度濃縮，Hoechst 33258 與之結合增強，染色呈強藍色熒光，而正常細胞只呈微弱熒光，死細胞則不被染色，由此可檢測出凋亡。 |
操作方法
1. 用適當?shù)姆椒ㄕT導細胞凋亡；
2. 用冷Buffer A 洗滌細胞二次，離心收集106 細胞于1.5mL 微量離心管中；（貼壁細胞原位固定染色）
3. 加入1mL 的4%溶液(用戶自備)，4℃固定細胞10min；
4. 離心去固定液，用Buffer A 洗兩遍；離心后留50～100μL Buffer A 重懸細胞；
5. 取上步驟50～100μL 細胞懸液涂片，自然晾干；
6. 滴加100μL Hoechst 33258 工作液（備注1），室溫染色10 min，水沖凈晾干；
7. 以紫外光340nm 波長激發(fā)，熒光顯微鏡下觀察。
儲存：2-8℃，避光，有效期一年。
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
川射干（標準品）英文名稱： 4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide磷化粘著斑激抗體包裝1g
川烏（標準品）英文名稱： 4-Nitrobenzyl alcohol磷化粘著斑激抗體包裝25g
川西獐牙菜（標準品）英文名稱： 4S Green Nucleic Acid Stain 4S Green下頜發(fā)育不良綜合征相關蛋白FAKD3抗體包裝5g
川芎（標準品）英文名稱： 5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedioneFAM134B蛋白抗體包裝25g
川芎(標準品)英文名稱： 5-Fluorocytidine磷化范可尼貧血組蛋白A抗體包裝5g
川續(xù)斷皂苷VI（標準品）英文名稱： 5-Methylindole范可尼綜合征相關蛋白FANCC抗體包裝100g
川續(xù)斷皂苷乙（標準品）英文名稱： 5-NitroguaiacolFXYD離子轉運調節(jié)因子6抗體包裝25g
穿山（標準品）英文名稱： 6-Bromo-2-naphtholFyn結合蛋白抗體包裝5g
穿山龍（標準品）英文名稱： 6-Dimethylallylamino purine riboside鋅指蛋白FYCO1抗體包裝100g
穿心蓮（標準品）英文名稱： 6-MethylcoumarinFYTTD1蛋白抗體包裝25g
穿心蓮內(nèi)酯（標準品）英文名稱： 7-Aminocephalosporanic acidRNA結合蛋白9抗體包裝5g
船形烏頭（標準品）英文名稱： 8-Hydroxyquinaldine巖藻糖轉移11抗體包裝1g
垂盆草（標準品）英文名稱： 9,10-Dibromoanthracene干擾誘導蛋白15抗體包裝25g
椿皮（標準品）英文名稱： 9,9-Bis(4-hydroxyphenyl) fluorineP38相互作用蛋白抗體包裝5g
慈溪麥冬皂苷A英文名稱： Acid blue 29鈣粘樣蛋白28抗體包裝1g
鮑曼不動桿菌Acinetobacter│baunannii 質量規(guī)格：進分,97%,一腎上腺髓質前體試劑盒去氫鉤藤堿;Corynoxeine
: =DSM16930=LMG22726資源名稱: 羽扇豆蒼白桿菌 質量規(guī)格：UV法含量測定；一物腎上腺髓質試劑盒3-氫化去氫松苓;Dehydrotra
: ATCC9642CBS246.65CMI91855IFO6342NRRL3536資源名稱: 黑曲霉 質量規(guī)格：純度≥98%,BR腎上腺能a1A受體試劑盒羥基酪;3,4-Dihydroxyph
Hoechst33258染色試劑盒芴
其他 9H-芴；二并五環(huán)；二亞基；2,2ˊ-亞甲基聯(lián)；鄰亞聯(lián)基；二次基；茀；甲基聯(lián)
英文名稱： Fluorene
其他英文名稱： Diphenylenemethane；2,2'-Methylenebiphenyl；2,3-Benzindene；o-Biphenylenemethane；alpha-Diphenylenemethane-9H-fluorene
產(chǎn)品規(guī)格： BR，99%
包 裝： 25克/100克/500克
CAS號：86-73-7
C13H10=166.22
級別：BR
含量：≥99.0%
熔點：111～114℃
性狀：葉狀或小片狀結晶或粉末。不純時有熒光。在高真空中易升華。易溶于冰乙,溶于二硫化碳、熱乙、、稀和稀堿,不溶于水。相對密度 1.202。沸點 298℃
用途：生化研究。染料。殺蟲劑。除草劑。樹脂。
保存：RT，保質期5年
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