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技術(shù)文章

如何解決使用Elisa試劑盒遇見的一些問題

閱讀:339          發(fā)布時(shí)間:2018-9-28

 在 Elisa試劑盒的使用過程中常見問題有很多如, 加樣器不確;尤其10ul以下的加樣器,對結(jié)果影響極大;  保溫設(shè)備不良;  洗滌用水不規(guī)范。
如何解決這些問題呢:
1在使用過程校正加樣器;10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國等);
2 仔細(xì)校正溫度到37℃,水浴箱為佳;  
3 必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來水、礦泉水等; 
4 認(rèn)真閱讀使用說明書。  
樣品加樣:  
1 加樣不準(zhǔn)確; 沒有混勻。加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯(cuò)加。  
2 加樣后,反復(fù)抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導(dǎo)致非特異性吸附。  洗滌  洗滌不*  ①每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘;②選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分;
3 可選用塑料洗滌瓶。  加酶反應(yīng) 漏加 滴加后,認(rèn)真檢查各孔  結(jié)果判斷  ①包括陰性對照孔在內(nèi),各孔顯色普遍偏深;②包括陽性對照在內(nèi),各孔均無顯色;③陽性對照不顯色,而其它樣本顯色正常;
4 有些標(biāo)本顯色不深,判斷陽性困難。  ①可能是洗滌不充分;加樣過量;溫育時(shí)間過長溫度過高;按說明書重新操作。如無改善, 可與;②可能是漏加樣本或酶液;溫育時(shí)間過短溫度過低;試劑保存不當(dāng)活性下降;按說明書重新 操作。如無改善,可與;③陽性對照漏加、錯(cuò)加或失效。重新操作。如無改善,可與,索要對照品; ④重新操作。使用酶標(biāo)儀,測定光吸收度,按P/N值標(biāo)準(zhǔn)判斷。  ELISA試劑盒保存 保存不規(guī)范 一定要在2-8℃存放。不得過高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。  對照品 對照品為凍干品 按對照管標(biāo)示,加入相應(yīng)體積的去離子水或蒸餾水復(fù)溶,充分溶解混勻。可按說明書使用。

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