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技術(shù)文章

ELISA試劑盒的原理

閱讀:429          發(fā)布時(shí)間:2020-5-25

ELISA試劑盒為捕獲抗體具有高親和力、高特異性、低內(nèi)毒素的單抗,研究者以刺激劑激活細(xì)胞時(shí),不會(huì)影響活化細(xì)胞分泌細(xì)胞因子。ELISA試劑盒的原理是什么?

到目前為止,ELISA法仍在研究當(dāng)中占有著主流地位,普遍應(yīng)用使得實(shí)驗(yàn)更加方便、經(jīng)濟(jì)和準(zhǔn)確, ELISPOT技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)也決定了它的發(fā)展?jié)摿?。LISPOT法來(lái)源于ELISA,相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破,是定量ELISA技術(shù)的延伸和發(fā)展。由于游離的循環(huán)抗體或CK的半哀期不同,使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結(jié)合,傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)不能確切的反映體內(nèi)的抗體及CK的水平。80年代,國(guó)外的科研工作者根據(jù)ELISA技術(shù)的基本原理,建立了體外檢測(cè)特異性抗體分泌細(xì)胞和CK分泌細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(ELISPOT)。 人類原態(tài)胚胎干細(xì)胞無(wú)需轉(zhuǎn)基因就能逃避分化,通過(guò)OCT4,KLF4,KLF2三種因子的表達(dá)可以維持其天然狀態(tài)。研究人員利用兔ELISA試劑盒兩種生成非轉(zhuǎn)基因原態(tài)人類胚胎干細(xì)胞(hESCs)的方法路徑。他們?cè)诩尤氤跏寂囵B(yǎng)基之前,首先令后致敏狀態(tài)的人類胚胎干細(xì)胞接觸組蛋白去乙酰酶抑制劑,這樣初始培養(yǎng)條件下的八細(xì)胞胚胎就能直接建立一種新細(xì)胞系。

ELISA試劑盒的原理包括了可以提了兩款改良型siRNA用于活體轉(zhuǎn)染。可以增加siRNA-轉(zhuǎn)運(yùn)試劑復(fù)合體的穩(wěn)定性。而SIRNAPLUS則不需要轉(zhuǎn)運(yùn)試劑,其轉(zhuǎn)運(yùn)載體就整合在siRNA分子上。為了解決這一問(wèn)題,公司開(kāi)發(fā)了一個(gè)試劑盒,可以將shRNA插入到基因組的特定位置。這一靶向整合試劑盒采用鋅指核酸酶技術(shù),將shRNAELISA試劑盒插入到人類基因組的AAVS1位點(diǎn)。這一技術(shù)將shRNA定位在一個(gè)地方,使影響shRNA表達(dá)水平的一個(gè)重要變量固定下來(lái)。

ELISA試劑盒普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗(yàn)。在這種方法中,通常標(biāo)準(zhǔn)配體是固定的,通過(guò)加入溶液相受體或蛋白質(zhì)來(lái)使之成鍵。通過(guò)加入與受體特異性反應(yīng)的抗體來(lái)定量成鍵的受體,而且一開(kāi)始抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測(cè)量。第二種抗體能識(shí)別抗體的末端,在其末端的堿性磷酸酯或過(guò)氧化物酶等與酶發(fā)生反應(yīng),從而使溶液顯色。  

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