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詳細(xì)解析高效液相色譜儀的3大系統(tǒng)

閱讀:1336      發(fā)布時(shí)間:2021-11-18
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  高效液相色譜儀是一款高度集成化、小型化、模塊化、智能化,同時(shí)又具有使用簡(jiǎn)單,維護(hù)簡(jiǎn)便,移動(dòng)性強(qiáng)等特點(diǎn)的高精度色譜儀器。其采用微電腦技術(shù),只需連接電腦色譜工作站軟件,就能輕松控制整臺(tái)儀器。使您的工作能夠化繁為簡(jiǎn),*從實(shí)驗(yàn)室解放出來(lái)!

 

  高效液相色譜儀3大系統(tǒng):
  系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),下面將分別敘述其各自的組成與特點(diǎn)。
  1、分離系統(tǒng):該系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長(zhǎng)度為10~50cm,內(nèi)徑為2~5mm,由"不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,住內(nèi)裝有直徑為5~10μm粒度的固定相。固定相中的基質(zhì)是由機(jī)械強(qiáng)度高的樹(shù)脂或硅膠構(gòu)成,它們都有惰性、多孔性和比表面積大的特點(diǎn),加之其表面經(jīng)過(guò)機(jī)械涂漬,或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因或配體的有機(jī)化合物。因此,這類(lèi)固定相對(duì)結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性。
  2、進(jìn)樣系統(tǒng):液相色譜儀一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作,進(jìn)樣量是恒定的。這對(duì)提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。
  3、輸液系統(tǒng):該系統(tǒng)包括高壓泵、流動(dòng)相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強(qiáng)為l.47~4.4X10Pa,流速可調(diào)且穩(wěn)定,當(dāng)高壓流動(dòng)相通過(guò)層析柱時(shí),可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng),可加快其在柱中的移動(dòng)速度,這對(duì)提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動(dòng)相貯存器和梯度儀,可使流動(dòng)相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變,包括改變洗脫液的極性、離子強(qiáng)度、PH值,或改用競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)都能獲得有效分離。
 
  使用注意事項(xiàng):
  1、流動(dòng)相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動(dòng)相要小心振動(dòng)盡量不引起氣泡;
  2、柱子是非常脆弱的,第1次做的方法,先不要讓液體過(guò)柱子;
  3、所有過(guò)柱子的液體均需嚴(yán)格的過(guò)濾;
  4、壓力不能太大,不要超過(guò)2000psi。

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