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技術(shù)文章

熒光微球免疫法玉米黃曲霉毒素含量快速測(cè)試方法

閱讀:1512          發(fā)布時(shí)間:2021-6-4

熒光微球免疫法玉米黃曲霉毒素含量快速測(cè)試方法

方案檢測(cè)原理:應(yīng)用時(shí)間分辨熒光競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析的原理,當(dāng)將樣品滴加在加樣區(qū)時(shí),樣品中的待測(cè)物與結(jié)合墊中的熒光微球標(biāo)記抗體結(jié)合并通過毛細(xì)作用向前層析,當(dāng)達(dá)到檢測(cè)區(qū)后,檢測(cè)線 T 線上固定的抗原與剩余的部分熒光微球標(biāo)記抗體結(jié)合,檢測(cè)線 T 線上結(jié)合的熒光微球標(biāo)記抗體的量與樣品中待測(cè)物的量成反比,質(zhì)控線 C 線結(jié)合的熒光標(biāo)記物樣品中待測(cè)物的量無關(guān),其它熒光標(biāo)記物繼續(xù)層析達(dá)到吸收區(qū)。層析結(jié)束后,用CSY-YG701讀取 T 線和 C 線的熒光強(qiáng)度并計(jì)算 T/C 值,通過儀器內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣品中待測(cè)物的含量。

 

方案介紹:玉米中黃曲霉毒素含量快速定量檢測(cè)方案選用CSY-YG701黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀(深圳市芬析儀器制造有限公司)、電子天平、離心機(jī)、粉粹機(jī)、渦旋振蕩器檢測(cè)設(shè)備,該方法操作簡(jiǎn)單,結(jié)果準(zhǔn)確,整體測(cè)試時(shí)間20分鐘左右。

 

一、實(shí)驗(yàn)所需器皿準(zhǔn)備

1、CSY-YG701黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀(深圳市芬析儀器制造有限公司)

2、電子天平(國(guó)產(chǎn))

3、離心機(jī)(國(guó)產(chǎn))

3、粉粹機(jī)(國(guó)產(chǎn))

4、渦旋振蕩器(國(guó)產(chǎn))

5、可調(diào)移液器1000-5000ul 可調(diào)移液器 20-200ul(國(guó)產(chǎn))

 

二、樣品前處理

1、準(zhǔn)確稱取2.0g粉碎均勻的谷物樣本,放入50ml離心管或者錐形瓶中,加入10ml樣品提取液,用旋渦振蕩器震蕩3分鐘混勻,混勻后即為樣品液。

2、混勻后,取1.5ml均勻的樣品液在離心管,并在3500轉(zhuǎn)以上離心5分鐘。

3、取離心液上清液200ul+1000ul樣品提取液震蕩5秒混勻即為待測(cè)液。

 

黃曲霉毒素

 

三、樣品檢測(cè)

1、開始檢測(cè):取60ul待測(cè)液+60ul熒光標(biāo)記物,放入新的離心管中,把移液器刻度調(diào)至90ul,然后在離心管中吸吐3次液體(避免氣泡出現(xiàn)),混勻之后取90ul滴入檢測(cè)卡內(nèi)(本步驟應(yīng)該在30s內(nèi)完成),滴入完成之后,立即將檢測(cè)卡放入恒溫孵育器內(nèi)孵育8分鐘后進(jìn)行檢測(cè)。

 

黃曲霉毒素檢測(cè)結(jié)果

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