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液相色譜的幾種方法

閱讀:1924        發(fā)布時間:2009-9-21
    液相色譜的幾種方法 
    ①液固吸附色譜。液相色譜中的一種,是基于物質(zhì)吸附作用的不同而實現(xiàn)分離。其固定相是一些具有吸附活性的物質(zhì)如硅膠、氧化鋁、分子篩、聚酰胺等。
 
 ?、谝阂悍峙渖V法?;诒粶y物質(zhì)在固定相和流動相之間的相對溶解度的差異,通過溶質(zhì)在兩相之間進(jìn)行分配以實現(xiàn)分離。根據(jù)固定相與流動相的極性不同,分為正相色譜和反相色譜。前者是用硅膠或極性鍵合相為固定相,非極性溶劑為流動相;后者是硅膠為基質(zhì)的烷基鍵合相為固定相,極性溶劑為流動相,適用于非極性化合物的分離。
 
 ?、垭x子交換色譜法?;陔x子交換樹脂上可電離的離子與流動相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進(jìn)行可逆交換,依據(jù)這些離子對離子交換基具有不同的親和力而實現(xiàn)分離。薄殼型離子交換樹脂柱效高,主要用來分離簡單的混合物;多孔性樹脂進(jìn)樣容量大,主要用來分離復(fù)雜混合物。
 
 ?、苣z滲透色譜法[1] 。又稱為尺寸排阻色譜法 。1959年首先用于生物化學(xué)領(lǐng)域。以溶劑為流動相,多孔填料(如多孔硅膠、多孔玻璃)或多孔交聯(lián)高分子凝膠為分離介質(zhì)的液相色譜法。當(dāng)混合物溶液入凝膠色譜柱后,流經(jīng)多孔凝膠時,體積比多孔凝膠孔隙大的分子不能滲透到凝膠孔隙里去而從凝膠顆粒間隙中流過,較早地被沖洗出柱外,而小分子可滲透到凝膠孔隙里面去,較晚地被沖洗出來,混合物經(jīng)過凝膠色譜柱后就按其分子大小順序先后由柱中流出達(dá)到分離的目的。用凝膠滲透色譜的優(yōu)點是:分離不需要梯度沖洗裝置 ;同樣大小的柱能接受比通常液相色譜大得多的試樣量;試樣在柱中稀釋少,因而容易檢測;組分的保留時間可提供分子尺寸信息;色譜柱壽命長。它的缺點是:不能分離分子尺寸相同的混合物,色譜柱的分離度低;峰容量??;可能有其他保留機理起作用時引起干擾。凝膠滲透色譜法為測定高聚物分子量和分子量分布提供了一個有效的方法,此外還可用來分離齊聚物、單體和聚合物添加劑等。
 
 ?、蓦x子色譜法。采用柱色譜技術(shù)的一種液相色譜法,樣品展開方式采用洗脫法。根據(jù)不同的分離方式,離子色譜可以分為離子色譜 、離子排斥色譜和流動相離子色譜3類。離子色譜法使用低容量的離子交換樹脂,分離機理主要是離子交換。離子排斥色譜法用高容量的樹脂,分離機理主要是利用離子排斥原理。流動相離子色譜用不含離子交換基團(tuán)的多孔樹脂,分離機理主要是基于吸附和離子對的形成。

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