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雙抗相比于單抗，雙抗的表達(dá)過程會(huì)存在很多副產(chǎn)物，如半抗體、3/4抗體、同源二聚體、輕鏈缺失、單臂缺失及聚集體等，這些副產(chǎn)物的存在會(huì)嚴(yán)重干擾雙抗的有效性以及安全性。
藥明康德發(fā)表了pH-鹽雙梯度洗脫法在MMC ImpRes混合模式層析純化基于WuXiBody雙特異性抗體的應(yīng)用，該論文使用LabChip GXII Touch HT儀器用于非還原CE-SDS分析。
WuXiBody是由藥明康德開發(fā)的新型雙特異性抗體（bsAb）。它的關(guān)鍵特征是用T細(xì)胞受體（TCR）恒定域取代了一個(gè)親本mAb的CH1 / CL恒定區(qū)，該設(shè)計(jì)旨在促進(jìn)同源重鏈（HC）-輕鏈（LC）配對(duì)。
下面我們一起來看看 LabChip 在雙抗純化檢測(cè)中發(fā)揮了什么作用呢？
檢測(cè)流程
LabChip GXII Touch HT用于非還原CE-SDS分析，所用芯片是Express。
蛋白質(zhì)樣品、標(biāo)準(zhǔn)、空白和Ladder在70℃加熱10 min，然后上機(jī)LabChip GXII Touch HT 進(jìn)行分析（每個(gè)run用2 μg樣品）。
結(jié)果展示
Protein A洗脫液，經(jīng)LabChip分析非還原CE-SDS。半抗體占16.7%，單臂缺失占1.8%，輕鏈缺失占8.5%。
MMC ImpRes洗脫液的純度達(dá)到98.1%，與Protein A洗脫液，副產(chǎn)物A、B和C的百分比分別從16.7%、1.8%和8.5%下降到0.3%、0.6%和0.4%。
如下表所示，非還原的CE-SDS和SEC-HPLC分析進(jìn)一步表明，MMC ImpRes洗脫液的純度分別為98.1%和98.8%。
總結(jié)
在這項(xiàng)工作中，作者證明了在pH-鹽雙梯度洗脫下進(jìn)行的MMC混合層析比在pH/鹽單洗脫下提供了更高的分辨率梯度洗脫，有效地去除單梯度洗脫不能去除的副產(chǎn)物，LabChip GXII Touch HT助力非還原CE-SDS分析。
