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技術(shù)文章

分析瘦肉精等腎上腺素β-興奮的實驗方法

閱讀:534          發(fā)布時間:2019-9-23

β腎上腺素興奮ji,主要用于防治人、畜支氣管哮喘和支氣管痙攣,治療劑量較低。在飼料中添 加β腎上腺素興奮ji如鹽酸ke倫特羅(瘦肉精)等具有營養(yǎng)再分配作用,提高飼料報酬,提高瘦肉率的 效果。鹽酸ke倫特羅在肌肉特別是在內(nèi)臟中會有高濃度的殘留,對人與動物的肝,腎及神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生危 害。歐盟早頒布法規(guī)93/257/EWG ( 98/536/EG修訂)禁止其作為飼料添加劑使用,美國和加拿大也禁用, 我國農(nóng)業(yè)部亦發(fā)文作出同樣規(guī)定。

 

 

樣品制備(肝、肉) 1.稱取5 g肝、肌肉或0.2 g視網(wǎng)膜勻質(zhì); 2.水解:蛋白酶水解肌肉;β-葡萄糖醛酸糖苷酶或硫酸酯酶水解肝或視網(wǎng)膜; 3.Extrelut 柱LLE,乙酸乙酯 / t-丁醇(90 / 10)洗脫; 4.用酸性氧化鋁SPE,乙酸乙酯和甲醇洗脫; 5.Screen Dau SPE,乙酸和甲醇淋洗,乙酸乙酯 / NH3 (97 / 3)洗脫。

 

 

色譜分離條件 Agilent 1100 系統(tǒng): G1312A二元泵系統(tǒng)、G1367A型自動進樣器、柱溫箱。 色譜柱: Merck Chromolith SpeedROD RP-18e    50 mm×4.6 mm(1000 µL/min,2000 µL/min)。 流動相: A相—水 + 5 mM 甲酸銨(pH=4.0); B相—水 / 乙腈 (5 / 95) 。 梯度設(shè)置:

 

MS/MS 檢測 API 4000™ LC-MS/MS液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng),Turbo V™ 離子源(無分流),正離子模式,MRM掃描方式。 

 

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