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技術(shù)文章

分析單端孢霉烯、霉菌毒素和玉米烯醇的實(shí)驗(yàn)方法

閱讀:713          發(fā)布時(shí)間:2020-4-26

色譜流動(dòng)相的制備: 1 M乙酸銨溶液:稱取77 g乙酸銨,溶于1 L HPLC級(jí)的水中。 流動(dòng)相A:在1 L水 (HPLC級(jí)) 中加入5 mL 1 M乙酸銨溶液。 流動(dòng)相B:在1 L甲醇 (HPLC級(jí)) 中加入5 mL 1 M乙酸銨溶液

 

樣品制備 基于Berthiller等人提出的方法[1]: 1.稱量10 g勻漿的樣品; 2.加入5 µL濃度100 µg/mL的ZAN的乙腈溶液; 3.加入40 mL乙腈 / 水(84 / 16); 4.在自動(dòng)振搖器以180 r/min的速度振搖提取90 min; 5.過濾提取液(S&S折疊過濾器, 595 ½, Whatman Schleicher & Schuell); 6.轉(zhuǎn)移8 mL提取液到樣品管中; 7.將MycoSep226#和227# (Romer實(shí)驗(yàn)室)推入樣品管(推薦使用226#,極性適應(yīng)范圍寬,但HPLC進(jìn)樣 4~5次后,應(yīng)用流動(dòng)相B相沖洗色譜柱10 min;若使用227#,ZON會(huì)滯留在色譜柱上,且NIV的回收率也 較低); 8.將4 mL經(jīng)過純化的提取液移入樣品管; 9.N2 流保護(hù)下,50 ℃溫和加熱揮干溶劑; 10.將殘留物溶于1 mL色譜流動(dòng)相A相中,渦流混合均勻; 11.0.22 µm濾膜(Millipore)過濾后,備用。

 

 

色譜分離條件 Agilent 1100 系統(tǒng):G1312A二元泵系統(tǒng)、G1367A型自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱。 色譜柱:Thermo Electron Aquasil,C18柱, 150 mm×4.6 mm,3 µm。 流動(dòng)相:A相—水 + 5 mM 甲酸銨;B相—甲醇 + 5 mM 甲酸銨

 

MS/MS檢測: API 3200™或3200 QTRAP® LC-MS/MS液質(zhì)分析系統(tǒng)。TurboIonSpray® 離子源,MRM掃描方式。 Period 1 (0~5 min):負(fù)離子模式:

 

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