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前言：主要成分為抗菌劑和激素的獸藥已廣泛用于疾病防治、促進生長和提高飼料轉化率。動物源性產品中，能夠引發(fā)過敏反應和抗生素耐藥性的獸藥殘留已成為消費者在購買產品時關注的問題。為保護公共健康，US FDA 于 2015 年 6 月通過獸藥飼料指令頒布了管控抗微生物藥物使用的終規(guī)定1 。歐盟法規(guī)請參見立法提案 2014/0257(COD)2 ，該法規(guī)將廢止并替代指令 2001/82/EC。新法規(guī)旨在達成影響評估所確定的目標，并解決抗生素耐藥性帶來的公共健康風險問題。在中國，為設定動物源食品中獸藥含量的大限值3 ，農業(yè)部發(fā)布了第 235 號公告3 。根據分析物和基質的不同，實現準確定量要求的范圍為 ppt 至 ppb 級。基質的復雜性加上不同類別獸藥的特性（如不同 pH 條件下的疏水性和穩(wěn)定性），導致難以在一次運行中檢測多個類別的分析物。常用標準方法可涵蓋一個類別或一小組相似類別的獸藥。為有效監(jiān)測獸藥并保護公共健康，迫切需要能夠在一次運行中檢測多個類別的分析物。 Agilent Ultivo 三重四極桿液質聯(lián)用系統(tǒng)十分符合這一要求。Ultivo 專門設計用于解決以環(huán)境和食品安全領域為代表的常規(guī)生產實驗室所面臨的許多挑戰(zhàn)。該系統(tǒng)融入了多項革命性創(chuàng)新，體積遠小于上一代三重四極桿系統(tǒng)，但性能絲毫不打折扣。雙六極桿設計使系統(tǒng)擁有離子傳輸效率。硬件和電子元件方面的提升使極性切換速度更快。此外，Ultivo 減少了用戶對系統(tǒng)維護的干預，使非專業(yè)質譜用戶也能夠通過 VacShield 真空盾和可拆卸檢測器從容應對系統(tǒng)運行和維護。

 

本應用簡報展示了一種分析篩查方法，能夠將 Ultivo 三重四極桿液質系統(tǒng)與 Agilent 1290 Infinity II UHPLC 聯(lián)用，分析豬肉和雞蛋中 27 個類別的 151 種獸藥。我們還證明了 Agilent EMR-Lipid 樣品前處理試劑盒具有廣泛的應用范圍。EMRLipid 能夠有效去除動物源基質中的高脂成分，并提供優(yōu)異的獸藥回收率

 

實驗部分：標準品和試劑獸藥標準品購自 Dr. Ehrenstorfer GmbH、WITEGA laboratorien Berlin-Adlershof GmbH、Toronto Research Chemicals (TRC) 或 AccuStandard, Inc。表 1 列出了該溶液中含有的 151 種化合物。在流動相配制中使用超純水（> 18.2 MΩ，Milli-Q 水系統(tǒng)）、乙腈（LC-MS 級，Fluka）和甲酸（98% 左右，質譜用，Fluka）。在樣品前處理中使用乙腈（HPLC 級，SigmaAldrich）、二甲基亞砜（DMSO，> 99.9%，Aldrich）、乙酸銨（≥ 98%，Sigma-Aldrich）和甲酸（98% 左右，HPLC 級， Fluka）。

圖 1 所示為實驗獲得的阿苯達唑、倍氯米松、氯霉素、四環(huán)素、竹桃霉素、依諾沙星、磺胺氯噠嗪和克侖特羅八個不同化學類別的八種化合物的校準曲線。

Ultivo 表現出*的分析靈敏度。多數化合物都可以在基質加標濃度為 2 ng/g 的條件下檢出。例如，雞蛋樣品中有 93% 的化合物能夠以信噪比 (S/N) 大于 10 的水平檢出，對定性離子和定量離子均是如此。圖 2 是加標濃度為 2 ng/g 的雞蛋樣品的樣品色譜圖。

 

圖 3 所示為不同基質濃度條件下定性離子和定量離子 S/N > 10 的化合物所占的比例。

方法精度通過七次重復測定對方法在加標濃度 5 ng/g 條件下的重現性進行研究。圖 4 所示為豬肉和雞蛋樣品加標濃度為 5 µg/kg 時分布比例的 %RSD (n = 7)。結果表明 %RSD 小于 20% 的化合物占 92%，重現性良好。

 

結論：本研究開發(fā)了一種能夠分析豬肉和雞蛋中 27 個類別的 151 種獸藥的便捷分析方法。分析靈敏度、準確度和精度結果證明，Agilent Ultivo 三重四極桿液質聯(lián)用是獸藥分析的可行解決方案。