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前言：尼卡巴嗪 (Nicarbazin) 為二硝基均二苯脲和羥基二甲基嘧啶的復(fù)合物，為黃色或 黃綠色粉末，用于預(yù)防雞和火雞球蟲病。GB 29691-2013 規(guī)定了尼卡巴嗪標(biāo)識(shí)殘 留物 4,4’-二硝基均二苯脲 (4,4’-dinitrocarbanilide) 殘留量的檢測(cè)方法。本文所述 方法參照 GB 29691-2013，建立了一種雞可食性組織中尼卡巴嗪殘留物分析的高效液相色譜法。本方法利用 Agilent Bond Elut C18 固相萃取柱對(duì)樣品進(jìn)行凈化， 并利用 Agilent Poroshell 120 EC-C18 色譜柱對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行快速分析。該方法適用 于雞肉、肝臟和腎臟組織中尼卡巴嗪標(biāo)識(shí)殘留物 4,4’-二硝基均二苯脲殘留量的 測(cè)定。

尼卡巴嗪分析 對(duì)試料進(jìn)行樣品前處理。稱取試料 2±0.02 g，于 50 mL 具塞離心管中，加入乙腈 10 mL，超聲 5 min，5000 r/min 離心 10 min，取上清液于 15 mL 具塞離心管中。殘 渣中加入乙腈 10 mL 重復(fù)提取一次，合并兩次上清液，于 60 °C 氮?dú)庵写蹈?。?乙腈 0.5 mL、正己烷 1 mL，渦旋溶解 3 min，溶液移至 15 mL 具塞離心管中。 用乙腈 0.5 mL、正己烷 1 mL 重復(fù)渦旋溶解一次，合并兩次溶液。加入正己烷 2 mL，渦旋混合 3 min，5000 r/min 離心 10 min，棄上層正己烷層。再加正己烷 2 mL，重復(fù)提取一次，5000 r/min 離心 10 min，取下層液，備用。

所得樣品提取液經(jīng) Agilent Bond Elut C18 固相萃取小柱凈化 和富集后，使用配備了 Agilent Poroshell 120 EC-C18 色譜柱 的高效液相色譜系統(tǒng)對(duì)其中的尼卡巴嗪標(biāo)識(shí)殘留物 4,4’-二 硝基均二苯脲進(jìn)行快速分析，如圖 1 所示為固相萃取操作 流程，如表 1 所示為液相色譜分析條件。

如圖 2、圖 3 和圖 4 所示，本文所述方法適用于雞肉和雞肝 臟中尼卡巴嗪殘留物 4,4’-二硝基均二苯脲的檢測(cè)，通過計(jì) 算得到定量限為 100 μg/kg（目標(biāo)物在樣品中的含量），在 線性范圍 0.05 μg/mL~5 μg/mL 內(nèi)線性相關(guān)系數(shù)良好。如表 2 所示，在 100-400 μg/kg 的添加水平下，不同基質(zhì)中 4,4’-二 硝基均二苯脲的回收率為 80.3%-95.2%，RSD (%) ≤ 7.31 (n=6)， 表明該方法的準(zhǔn)確度和精密度滿足 GB 29691-2013 的分析要求。 文中所采用的 Bond Elut C18 固相萃取柱是安捷倫硅膠基 質(zhì)反相固相萃取產(chǎn)品，可有效保留和凈化目標(biāo)物。檢測(cè)時(shí)， 配合 Poroshell 120 EC-C18 色譜柱可對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行快速分析。