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加拿大NRC標(biāo)準(zhǔn)品CRM-PnTX-G江瑤青毒素G認證校準(zhǔn)溶液儲存和使用說明

時間:2024/3/4閱讀:561
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預(yù)期用途

是一種經(jīng)過認證的校準(zhǔn)溶液,旨在開發(fā)分析方法和準(zhǔn)確定量PnTX-G。CRM-PnTX-G的濃度使其適合于制備用于校準(zhǔn)液相色譜(LC)和液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)儀器的稀釋系列,以及用于回收實驗的貝類對照樣品的加標(biāo)。

儲存和使用說明

為確保穩(wěn)定性,該材料應(yīng)在-12°C或以下未開封的條件下儲存。同樣,該材料的任何稀釋液都應(yīng)儲存在-12°C或以下的低頂空小瓶中。

打開前,應(yīng)將每個安瓿加熱至室溫,并將內(nèi)容物充分混合。安瓿應(yīng)在預(yù)先刻好的標(biāo)記處打開。安瓿打開后,應(yīng)使用校準(zhǔn)的容量設(shè)備取出準(zhǔn)確的等分試樣,并將其轉(zhuǎn)移到容量瓶或小瓶中。如果溶液打開超過幾分鐘,則會因甲醇蒸發(fā)而導(dǎo)致濃度增加。建議CRM-PnTX-G溶液不應(yīng)蒸發(fā)至干,因為玻璃表面可能會有損失。注:溶液的體積未經(jīng)認證。因此,安瓿的全部內(nèi)容物不應(yīng)簡單地轉(zhuǎn)移到容量瓶中并稀釋至一定體積。

CRM-PnTX-G的制備

是在新西蘭Cawthron研究所從南澳大利亞收獲的受自然污染的太平洋牡蠣(Crassostrea gigas)中分離出來的[6]。通過1H核磁共振(NMR)證實了用于制備CRM-PnTX-G的PnTX-G的結(jié)構(gòu)和純度(圖1)。LC-MS/MS產(chǎn)物離子光譜顯示片段化,這是PnTX-G的特征(圖2)。LC-MS還用于估計PnTX-G儲備溶液的一般純度(3µm Hypersil BDS C8柱,150×2.1mm;流動相由水(A)和乙腈/水(95/5)(B)組成,每個含有2mM甲酸銨和50mM甲酸(pH 2.3);在20分鐘內(nèi)以200µL/min的速度從10至100%B進行梯度洗脫+20°C柱溫)。未觀察到主要雜質(zhì)。然而,檢測到一些與PnTX相關(guān)的次要雜質(zhì)([M+H]+=M/z 708)(圖3)。使用等度洗脫條件,PnTX雜質(zhì)相對于PnTX-G的總比例<0.1%(柱:1.9µm Hypersil Gold C18,50×2.1 mm;如上所述的A和B溶劑;35%B,300µL/min+20°C柱溫)。

通過將純PnTX-G溶解在CD3OH中用于定量NMR來制備儲備溶液。CRM溶液是通過在脫氣的高純度甲醇(含0.01%乙酸)中準(zhǔn)確稀釋儲備溶液來制備的。將該溶液用Teflon攪拌棒和磁力攪拌器充分混合,同時在氬氣氛下的冰浴中冷卻。將等分試樣分配到干凈的充滿氬氣的琥珀色玻璃安瓿中,然后立即對其進行火焰密封。


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