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Y187感受態(tài)細(xì)胞
  • Y187感受態(tài)細(xì)胞

貨物所在地:上海上海市

更新時間:2025-06-19 21:00:07

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上海淳麥生物科技有限公司在感受態(tài)細(xì)胞的研發(fā)方面,實力雄厚,擁有了克隆、表達(dá)、酵母和農(nóng)桿菌4大類,共計百余種感受態(tài)細(xì)胞。在電擊感受態(tài)方面,擁有了大腸桿菌 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞和農(nóng)桿菌電擊感受態(tài)種類,極大提高了客戶在轉(zhuǎn)基因以及文庫構(gòu)建方面的成功率。
貨號:CM-6066G
供應(yīng)商:上海淳麥
數(shù)量:1000只
英文名:Mach1-T1Chemically Competent Cell
保質(zhì)期:1年
保存條件:零下80度
規(guī)格:20*100ul

Y187酵母感受態(tài)細(xì)胞基因型:

MATα, ura3-52, his3-200, ade 2-101,  trp 1-901, leu 2-3, 112, gal4Δ, met, gal80Δ, URA3 : : GAL1UAS-GAL1TATA-lacZ, MEL1


Y187酵母感受態(tài)細(xì)胞簡要說明:
Y187菌株是Clontech公司開發(fā)的GAL4系統(tǒng)酵母單雜,雙雜實驗用菌株,MATα型,可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?;蚺cMATa型酵母菌株(Y2HGoldAH109等)通過mating操作進(jìn)行篩庫試驗。
Transformation  marker: trp1, leu2,報告基因為:lacZ, MEL1。
Y187 -GAL4酵母雙雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用:PGBKT7PGADT7
質(zhì)粒PGBKT7的篩選標(biāo)志為TRP1,用于表達(dá)DNA-BD(來自酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4N1~ 174位氨基酸)與目標(biāo)蛋白(Bait)的融合蛋白;
Y187酵母感受態(tài)細(xì)胞操作說明:

  1.  取100 μl冰上融化的Y187感受態(tài)細(xì)胞,依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒2-5ug,Carrier DNA(95-1005min,快速冰浴,重復(fù)一次)10 ul ,PEG/LiAc  500ul并吸打幾次混勻,30度水浴30 分鐘(15 min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。
  2.  將管放42度水浴15min  (7.5 min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。 

3. 5000 rpm 離心 40s 棄上清,ddH2O 400ul 重懸,離心 30s 棄上清。
4. ddH2O 50ul重懸,涂板,29℃培養(yǎng)48-96h。
 

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