DH10Bac感受態(tài)細胞
DH10Bac Chemically Competent Cell

DH10Bac感受態(tài)細胞基因型：
F- mcrA (mrr-hsdRMS-mcrBC)  80lacZM15 lacX74 recA1 endA1 araD139 ? (ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG /pMON14272 / pMON7124
DH10Bac感受態(tài)細胞簡要說明：
CMbio DH10Bac感受態(tài)主要用于生產(chǎn)重組桿狀病毒分子（Bac-to-Bac桿狀病毒表達系統(tǒng)）。CMbio DH10Bac菌株中含有父本桿粒 bMON14272 、輔助質(zhì)粒 pMON7124 ：父本桿粒 bMON14272包含 mini-F復(fù)制子, 卡那抗性基因, attTn7 位點和 lacZα互補因子；輔助質(zhì)粒 pMON7124 含有 tnsABCD區(qū)（tnsABCD region supplies the transposition proteins required for insertion of the mini-Tn7 from the donor plasmid into its target site on the parent bacmid），具有四環(huán)素抗性，在細胞擴增過程中丟失，但可提高供體質(zhì)粒pFastBac轉(zhuǎn)化后的基因轉(zhuǎn)座效率。mcrA、mcrBC及mrr突變使DH10Bac菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA（Therefore , genomic DNA , both  prokaryotic and eukaryotic, can be cloned efficiently in DH10Bac）。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。φ80dlacZ?M15的存在使DH10Bac可用于藍白斑篩選，CMbio High5^TM系列DH10Bac感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>10⁸cfu/μg。
DH10Bac感受態(tài)細胞操作說明：

1. CMbio DH10Bac感受態(tài)細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中），加入目 的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)液（2YT或LB），混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少13h。
DH10Bac感受態(tài)細胞注意事項：

1.  CMbio 感受態(tài)細胞在冰上融化。
2.  混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。