HB101感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格:

HB101感受態(tài)細(xì)胞基因型：
F- mcrB mrrhsdS20(r_B^- m_B^-) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1rpsL20((str^R)glnV44λ^-
HB101感受態(tài)細(xì)胞簡(jiǎn)要說(shuō)明：
CMbio HB101菌株是 E. Coli K12菌株和 E. Coli B 菌株的雜合產(chǎn)物（同時(shí)也是Stbl3的原始菌株）。
recA13突變可有效抑制長(zhǎng)片段末端重復(fù)區(qū)的重組，降低錯(cuò)誤重組的概率；但不含核酸酶endA1突變，體內(nèi)核酸酶含量較高，提取質(zhì)粒時(shí)務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液。hsdS20背景使HB101缺失內(nèi)切酶系統(tǒng)，增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量；此菌株具有鏈霉素抗性；不存在lacI^qZΔM15，不可用于藍(lán)、白斑篩選。HB101感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>5×10⁸cfu/μg。
 HB101感受態(tài)細(xì)胞操作說(shuō)明：

1. CMbio HB101感受態(tài)細(xì)胞放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

1.  將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。

HB101感受態(tài)細(xì)胞注意事項(xiàng)：

1.  CMbio 感受態(tài)細(xì)胞處于冰水混合狀態(tài)時(shí)立即插入冰上。
2.  混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。