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體視顯微鏡在雞蛋胚胎觀察中的應(yīng)用
閱讀：2337 發(fā)布時間：2021-4-27
在大量的化妝品廣告中我們都能夠聽到“無刺激，低刺激，零刺激”等宣傳語，那么除了自體測試以外實(shí)驗(yàn)室是怎么測試化妝品的刺激性呢？
現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室中已經(jīng)用雞胚模型代替了大部分的動物實(shí)驗(yàn)，因?yàn)榉趸碾u蛋胚胎中期表面血管豐富，可以看作一個完整的生物體，且表面透明便于在實(shí)驗(yàn)中觀察血管及其網(wǎng)絡(luò)的形態(tài)結(jié)構(gòu)、顏色和通透性的變化，結(jié)合絨毛尿囊膜蛋白質(zhì)性質(zhì)改變判斷其受損程度，評估受試物的刺激性。此研究方法經(jīng)濟(jì)，且實(shí)驗(yàn)方法簡單，易操作。
實(shí)驗(yàn)方法：將在恒溫恒濕孵育箱中孵育至第九天至第十天的受精雞蛋取出到無菌操作臺，從雞蛋的氣室端剪開蛋殼，小心剝?nèi)サ澳ぜ绰冻鲅芑慕q毛尿囊膜。肉眼觀察尿囊膜的完整性及有無出血點(diǎn)等變化，如有出血點(diǎn)或尿囊膜破損則剔除，不能用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。將100μl的液體受試物加入置于CAM上限定面積的無刺激性橡膠環(huán)內(nèi),環(huán)直徑1.5cm。固體受試物0.11g,用水濕潤后,均勻的涂在直徑1.5cm的無刺激性樹脂薄片上,與CAM接觸。20s后,用5ml的溫?zé)嵴麴s水輕輕沖洗。
在一段時間之后用體視顯微鏡觀察絨毛尿囊膜上的血管及其網(wǎng)絡(luò)的形態(tài)結(jié)構(gòu)、顏色和通透性的變化(溶血、出血、凝血)，結(jié)合絨毛尿囊膜蛋白質(zhì)性質(zhì)改變判斷其受損程度，評估受試物的刺激性。用顯微鏡相機(jī)MS60進(jìn)行原位攝影，記錄及分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
雞胚模型實(shí)驗(yàn)驗(yàn)條件簡單，材料易于獲取，方法易于掌握，應(yīng)用范圍廣泛可檢測洗滌類產(chǎn)品及其表面活性劑原料的刺激性、化妝品、護(hù)膚品、等的毒性實(shí)驗(yàn)，在日用化妝品公司、藥廠等都會應(yīng)用。體視顯微鏡加顯微鏡相機(jī)是該實(shí)驗(yàn)的必要配置。