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硫酸葡聚糖鈉DSS(4W)誘導(dǎo)結(jié)腸炎實驗操作方法

時間:2024/9/30閱讀:456
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葡聚糖硫酸鈉(Dextran Sulfate Sodium, DSS)是一種化學合成的多糖硫酸酯,主要由葡糖醛酸單位通過硫酸酯鍵連接而成。其分子式為[C6H7O6Na2O10S]n,分子量在5-500kDa之間。DSS本身對人體幾乎無毒,不能被結(jié)腸上皮細胞吸收,但是可以損傷結(jié)腸上皮細胞的緊密連接和基底膜,從而增加腸道滲透性,導(dǎo)致腸道菌群和其他抗原進入黏膜下層和體循環(huán),激活免疫炎癥反應(yīng),誘導(dǎo)結(jié)腸炎癥狀。


硫酸葡聚糖鈉DSS 36000~50000(平均分子量4W) 是常用的一種結(jié)腸炎造模劑,可通過損傷結(jié)腸上皮細胞,誘導(dǎo)結(jié)腸炎癥狀,廣泛用于結(jié)腸炎動物模型的建立。


DSS 36000~50000(分子量4W) 誘導(dǎo)結(jié)腸炎主要特點如下:

1. 作用機制:DSS不能被結(jié)腸上皮細胞直接吸收,但可損傷上皮細胞緊密連接和基底膜,導(dǎo)致腸道滲透性增加,促進腸道菌群和抗原滲入,激活免疫系統(tǒng),誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)。

2. 誘導(dǎo)結(jié)腸炎:給予適量DSS可以在小鼠等動物體內(nèi)迅速誘導(dǎo)急性或慢性結(jié)腸炎癥狀,表現(xiàn)出典型的體重減輕、稀便、血便、貧血等,病理表現(xiàn)為結(jié)腸炎癥滲出和潰瘍。

3. 可控性:DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎癥狀是可逆的,停止DSS治療后可自行愈合。DSS的濃度和給藥劑量可以控制結(jié)腸炎的嚴重程度,實現(xiàn)從輕度到高度急性甚至慢性炎癥的誘導(dǎo)。

4. 簡便高效:DSS造模簡單高效,相比之下,需要較長時間誘導(dǎo)的基因敲除等方法更加耗時費力。是結(jié)腸炎研究的理想工具。


DSS 36000~50000(平均分子量4W) 誘導(dǎo)結(jié)腸炎的典型方案:

1. DSS溶液:DSS粉末用蒸餾水配制成3-5%的溶液,于4°C保存。

2. 給藥方式:在飲用水中添加DSS溶液,使小鼠自由飲用。另外也可灌胃給藥。

3. DSS濃度和時間:3-5%DSS,5-10天,可誘導(dǎo)輕-中度結(jié)腸炎;2%DSS,3周左右,可誘導(dǎo)慢性結(jié)腸炎。濃度和時間可根據(jù)需要調(diào)整。

4. 評價指標:體重變化、稀便和血便評分、貧血、結(jié)腸組織病理學檢查等。


DSS 36000~50000(分子量4W) 誘導(dǎo)結(jié)腸炎的操作方法主要如下:

1. DSS溶液的配制:

- DSS粉末于室溫下加熱至全溶,或在60°C水浴中加熱溶解;也可使用磁力攪拌在室溫下溶解。

- 一般配制成3-5%的溶液,除菌過濾后4°C保存,2周內(nèi)使用。

- 確保DSS完(空)全溶解,避免粉末殘留,影響實驗結(jié)果。

2. 給藥方式:

- 自由飲用:在飲用水中直接添加DSS溶液,供小鼠自由飲用。此法操作簡單,但DSS攝入量難以準確控制。

- 灌胃給藥:以所需DSS量重組為相應(yīng)濃度的溶液,每天灌胃給藥1次。此法DSS攝入可控,但對小鼠的創(chuàng)傷較大。

3. DSS處理方案的選擇:

- 急性結(jié)腸炎:3-5%DSS,5-10天??烧T導(dǎo)中度至重度急性結(jié)腸炎。

- 慢性結(jié)腸炎:1-3% DSS,2-4周。通過低劑量長時間的刺激誘導(dǎo)慢性炎癥。

- 濃度和時間可根據(jù)研究需要調(diào)整,從輕度到高度炎癥都可實現(xiàn)。

4. 動物觀察和樣本收集:

- 日常觀察:體重、食欲、糞便狀況等。記錄DSS治療前后的變化。

- 末期處死:收集結(jié)腸組織、血液、糞便等樣本用于病理學檢查、生化指標測定等。

- 對照組設(shè)置:以PBS代替DSS治療的對照組動物,用于結(jié)果比較分析。

5. 結(jié)腸炎的評估:體重變化、DSS刺激前后的糞便評分、貧血測試、結(jié)腸病理學檢查(炎癥程度、潰瘍數(shù)等)。


常用誘導(dǎo)劑:

HB12089 2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)

HC86040 雨蛙素 Ceruletide

HC80476 半胱胺鹽酸鹽 2-Aminoethanethiol HCl, 用于十二指腸潰瘍造模

HS91679 牛磺膽酸鈉水合物 Sodium taurocholate hydrate

HS81762 碘乙酸鈉 Sodium iodoacetate,可用于骨關(guān)節(jié)炎(OA)動物模型的建立

HT0056 脂多糖LPS Lipopolysaccharides 055:B5

HA1132 硫酸葡聚糖鈉DSS 36000~50000(結(jié)腸炎造模用葡聚糖硫酸鈉4W)

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