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凱氏定氮儀測定蛋白質(zhì)的方法確認(rèn)怎么做

閱讀:922        發(fā)布時間:2020-7-1

關(guān)鍵的是計(jì)算:

  baiX =((duV1-V2)*N*0.014)/( m*(10/100)) *F*100% 

  X:樣品中蛋白質(zhì)的百分含zhi量,g;

  V1:樣品消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體dao積,ml;

  V2:試劑空白消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,ml;

  N:硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度;

  0.014:1N硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液1ml相當(dāng)于氮克數(shù);

  m:樣品的質(zhì)量(體積),g(ml);

F:氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)。蛋白質(zhì)中的氮含量一般為15~17.6%,按16%計(jì)算乘以6.25即為蛋白質(zhì),乳制品為6.38,面粉為5.70,玉米、高粱為6.24,花生為5.46,米為5.95,大豆及其制品為5.71,肉與肉制品為6.25,大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83,芝麻、向日葵為 5.30。

賽亞斯凱氏定氮儀概述:

KDN凱氏定氮儀是依據(jù)經(jīng)典(凱氏定氮)方法設(shè)計(jì)的自動測氮蒸餾系統(tǒng)。儀器主要工作流程有:自動加水(含自動水位檢測功能)、自動加堿(按鈕控制)、手動加酸(手工配置)、自動蒸餾(按鈕控制)等幾部分。該儀器操作簡單;使用安全、可靠;省時、省力;適用于糧油檢測、飼料分析、植物養(yǎng)分測試、土肥檢測、醫(yī)藥、化工等行業(yè)的分析、教學(xué)及研究中,是操作使用人員的理想工具。2.工作原理 (凱氏原理):

蛋白質(zhì)是含氮的有機(jī)化合物。食品和硫酸及催化劑一同加熱消化,使蛋白質(zhì)分解,分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。然后在堿化蒸餾作用下使氨游離,釋放出來的氨氣和水蒸氣一起經(jīng)過冷凝管冷凝后,進(jìn)入裝有硼酸的錐形瓶中。被硼酸吸收后再用硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù),即得到蛋白質(zhì)含量。

2.1.(消化爐部分)有機(jī)物中的銨根在強(qiáng)熱和催化劑及濃H2SO4 作用下,硝化生成(NH4)2SO4

  反應(yīng)式為: 2NH2-+H2S04+2H+=(NH4)2S04

2.2.(蒸餾器部分)裝有消化后樣品的消化管在高溫蒸汽作用下與堿作用,放出NH3 和水蒸氣,收集于H3BO3 溶液中

  反應(yīng)式為: (NH4)2SO4+2NaOH高溫蒸汽=2NH3↑+2H2O+Na2SO4

  2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O

2.3. (滴定部分)用已知濃度的H2SO4(或HCI)標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,根據(jù)HCI消耗量計(jì)算出氮的含量,然后乘以相應(yīng)的換算因子,得到蛋白質(zhì)的含量

  反應(yīng)式為: (NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3

   (NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3

3.操作步驟:

取樣→    消化 →   蒸餾→    滴定 →   計(jì)算

4.整套儀器組成:

含消化爐(本公司供選配KDN-04C、KDN-08C、KDN-20C等消化爐型號)和KDN系列凱氏定氮儀蒸餾器組成。

二.技術(shù)參數(shù)

1.測定品種:糧食、飼料、食品、乳制品、飲料、土壤、水、藥物、沉淀物和化學(xué)品等。

2.工作方式:半自動。

3.測定數(shù)量:采用單個連續(xù)蒸餾測量。

4.測定范圍:含氮在0.1~200mgN(毫克氮) (含氮量0.1%~99%)

5.回收率:≥99%(相對誤差,包括消化過程)

6.重復(fù)率:相對標(biāo)準(zhǔn)偏差<±1%

7.工作時間:蒸餾時間5-15分鐘( 根據(jù)樣品和含氮量的不同而定)

8.額定電壓: 220V/50Hz。

9.  額定功率:800W

10.冷卻水消耗: 3-4L/min(水溫低于25度)

 

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