一、人絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)ELISA檢測試劑盒規(guī)格參數(shù)

中文名稱：人絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)ELISA檢測試劑盒

規(guī)格：48T 96T

種屬：人

品牌：臻科生物

檢測波長：450nm

所需樣本體積：保險量50ul

適用范圍：僅供科研，不得用于臨床診斷，臨床的標本做課題是可以用的。

檢測目的：用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)的含量。

檢測樣本種類：血清，血漿，尿液，組織勻漿，細胞上清液，腦脊液，灌洗液，糞便等樣本.

臻科供應屬種有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、人子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物、魚、昆蟲ELISA試劑盒等

二、ELISA試劑盒組成

三、樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20 分鐘，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上

清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心

20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次

離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程

中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/

分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞

濃度達到100 萬/ml 左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20 分

鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?/span>

用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器

將標本勻漿充分。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待

檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上

進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

四、注意事項：

1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未

用完，板條應裝入密封袋中保存。

2． 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3． 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好

控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，zui好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值

大于標準品孔第一孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計

算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6． 底物請避光保存。

7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9． 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

五、ELISA試劑盒計算

以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，

在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD

值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋

倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD 值計算出標

準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值

代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋

倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

六、ELISA試劑盒性能

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R 值為0.990 以上。

2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%

3.保存條件及有效期：2-8℃冷藏，試劑盒保質(zhì)期6個月。

七、特別提醒

由于現(xiàn)有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術風險。

1. zui終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關，請務必準備充足的標本備份。
2. 不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別，如：檢測限、靈敏度以及顯色時間等，請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作，電子版說明書僅作參考。
3. 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到*的檢測結(jié)果。
4. 本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。
5. 使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質(zhì)的引入導致ELISA實驗結(jié)果偏差。
6. 若樣本為細胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。
7. 某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。