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利用AFM對小細胞外囊泡進行定量納米力學分析
腫瘤衍生的小細胞外囊泡 (sEV) 的納米力學特性對癌癥進展至關重要。最近，國家納米中心的楊延蓮研究員、王琛研究員、朱凌研究員等人合作的工作以“Quantitative Nanomechanical Analysis of SmallExtracellular Vesicles for Tumor Malignancy Indication"為題發(fā)表于ADVANCED SCIENCE，在原子力顯微鏡 (Dimension FastScan AFM ,Bruker) 上利用納米壓痕在單囊泡水平上定量研究人乳腺癌細胞衍生的 sEVs 的納米力學特性，并探索它們與腫瘤惡性程度和囊泡大小的關系。結果表明，sEVs的剛度是由sEVs 的彎曲模量和滲透壓共同作用的結果。剛度和滲透壓隨著sEV惡性程度的增加而增加，并隨著sEV尺寸的增加而降低。彎曲模量隨著sEV惡性程度的增加而降低，并且在較小的sEV中較低。這項研究建立了sEV的納米力學特征與惡性腫瘤之間的關系，為更好地理解癌癥力學生物學提供了更多的參考信息。
癌癥機制生物學在腫瘤的進展和轉移中起 著重要作用。細胞根據(jù)環(huán)境中的動態(tài)機械 力不斷調(diào)整它們的行為，以維持組織的生理穩(wěn)態(tài)。在惡性轉化過程中，由于穩(wěn)態(tài)破壞的機械刺激，細胞的納米力學特性發(fā)生了改變，調(diào)節(jié)細胞的基本行為和微環(huán)境，最終導致腫瘤的侵襲和轉移。腫瘤的納米力學特征已成為腫瘤發(fā)生和腫瘤進展的診斷標志物。
小細胞外囊泡 (sEVs) 是幾乎所有細胞釋放的內(nèi)體衍生的膜囊泡，在各種體液中含量豐富。由于它們攜帶質(zhì)膜和細胞內(nèi)內(nèi)容物，例如來自源細胞的細胞質(zhì)蛋白和核酸，它們的納米力學特性代表了源細胞的納米力學特性。因此，它們可以作為研究腫瘤納米力學的理想模型。sEV作為將蛋白質(zhì)、核酸和脂質(zhì)運輸?shù)绞荏w細胞的載體。sEV的納米力學特性決定了它們在細胞內(nèi)通信等基本過程中的行為，在細胞外基質(zhì)(ECM) 中的擴散和運輸，以及在循環(huán)過程中對血液流變學的反應，這最終決定了腫瘤的侵襲和轉移。建立腫瘤來源性sEV的納米力學特征之間的全面通信，有助于闡明sEV在腫瘤進展和轉移中的作用，導致癌癥診斷標志物的發(fā)展。此外，sEV具有高生物相容性、低免疫原性和跨越生物障礙的能力，作為藥物傳 遞載體受到越來越多的關注。sEV的納米力學表征為優(yōu)化工程 sEV以提高藥物給藥效率提供了重要的信息。然而，sEV的納 米力學表征一直很少。最近的幾項研究通過測量楊氏模量來 估計腫瘤衍生的sEv的剛度，楊氏模量代表了s的剛度，作為整體彈性球形的模型。
最近，一些研究表明，小囊泡的剛度是由納米力學特性（如彎曲模量和滲透壓）的共同貢獻造成的，而這些特性不能單獨用楊氏模量來區(qū)分。腫瘤來源性sEV的個體納米力學特性與惡性轉化之間的關系在很大程度上尚不清楚。原子力顯微鏡(AFM)以其高空間分辨率而聞名，并已被用于表征單個EV的動力學及其與生物分子的 相互作用。AFM上的納米壓痕記錄了單個sEV在局部點的納米力學響應，從中可以從力壓痕曲線(FICs)中定量提取單個納米力學因子。sEV在jianduan納米壓痕過程中的納米力學行為反映了sEV在生理和病理環(huán)境下對納米力學刺激的響應。
該研究通過AFM上的納米壓痕在單個囊泡水平上定量表征乳腺癌衍生的sEVs的納米力學特征，并探討它們與腫瘤惡性的相關性。還比較了不同大小的sEV亞群，因為已知sEV的異質(zhì)大小與不同的分子組成和納米力學特性有關，這些特性決定了sEV亞群作為診斷標志物的重要性。證明了sEV的剛度由sEV的彎曲模量和滲透壓的綜合貢獻決定。彎曲模量隨著sEV惡性程度的增加而降低，并且在具有較小尺寸的sEV中較低，而剛度和滲透壓隨著sEV惡性程度的增加而增加，并隨著sEV尺寸的增加而降低。這些結果闡明了sEV力學生物學在腫瘤進展和轉移中的作用，顯示了sEV納米力學特性在評估腫瘤惡性程度方面的潛力。
