經(jīng)皮給藥制劑透皮擴(kuò)散試驗(yàn)（IVPT）的關(guān)鍵注意事項(xiàng)

一、皮膚模型的標(biāo)準(zhǔn)化選擇與處理

1. 優(yōu)先選擇巴馬香豬皮膚

巴馬香豬皮膚因角質(zhì)層厚度（15-20μm）、毛囊密度（11-14個(gè)/cm²）及脂質(zhì)組成（神經(jīng)酰胺含量與人類接近）與人類皮膚高度相似，被推薦為IVPT的“金標(biāo)準(zhǔn)”模型。其藥物滲透率與人體數(shù)據(jù)的相關(guān)性（R²可達(dá)0.85-0.95）顯著優(yōu)于小鼠等其他動(dòng)物模型。 其優(yōu)勢不僅體現(xiàn)在科學(xué)準(zhǔn)確性上，還兼顧了實(shí)驗(yàn)可行性和倫理合規(guī)性，是藥物開發(fā)、化妝品評(píng)估等領(lǐng)域不可替代的工具。

北京YSKD 元森凱德生物公司巴馬香豬皮，有資質(zhì)，并已經(jīng)被發(fā)表高分論文

備注：北京元森凱德生物技術(shù)公司（YSKD Bio-technology Beijing,China）的實(shí)驗(yàn)用巴馬香豬豬皮是一種用于透皮試驗(yàn)、燒傷研究、心血管研究等領(lǐng)域的動(dòng)物模型。它的皮膚與人類的皮膚非常相似，具有優(yōu)良的品質(zhì)和穩(wěn)定的遺傳基因。實(shí)驗(yàn)用巴馬香豬月齡20 -45天，豬皮的大小約為A4紙大小，厚度1mm左右，無添加化學(xué)試劑，全程冷鏈運(yùn)輸。

有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖許可的養(yǎng)殖場，可提供質(zhì)量合格證，個(gè)案信息表

收到后儲(chǔ)于-18℃冷凍儲(chǔ)存，時(shí)間不宜超出三個(gè)月，該巴馬小豬皮膚已經(jīng)經(jīng)過加工處理，皮下組織以及毛發(fā)均處理干凈，可以直接用于實(shí)驗(yàn)。

中國科學(xué)院海洋研究所，青島海洋科技中心海洋藥物與生物產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)室，中國科學(xué)院大學(xué)等采購北京元森凱德生物公司巴馬香豬皮

2. 皮膚完整性驗(yàn)證

- 完整性測試方法：需在實(shí)驗(yàn)前后采用經(jīng)皮水分散失（Trans Epidermal Water Loss, TEWL）法或電阻抗法驗(yàn)證皮膚屏障完整性。例如，TEWL接受標(biāo)準(zhǔn)通常為≤15g/m²/hr（人體軀干皮膚），高于此閾值則需排除。

- 電阻抗范圍：FDA規(guī)定電阻值應(yīng)介于空白介質(zhì)溶液電阻的3-20倍之間，過低（屏障受損）或過高（角質(zhì)層過厚）均需剔除。

3. 離體皮膚的保存與活性維持

- 巴馬香豬離體皮膚需在24-48小時(shí)內(nèi)使用，避免冷凍保存導(dǎo)致的角質(zhì)層結(jié)構(gòu)破壞。實(shí)驗(yàn)前需平衡皮膚溫度至32℃±0.5℃，以模擬生理?xiàng)l件。

二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與操作規(guī)范

1. 擴(kuò)散池的選擇與校準(zhǔn)

- 推薦使用符合《美國藥典》和NMPA指導(dǎo)原則的改良型Franz垂直擴(kuò)散池，確保擴(kuò)散面積（1.77cm²）和溫度控制精度（±0.5℃）。

- 需定期校驗(yàn)設(shè)備，如自動(dòng)取樣器的誤差應(yīng)≤±0.1ml，并執(zhí)行3Q驗(yàn)證（安裝、操作、性能確認(rèn)）。

2. 環(huán)境條件控制

- 溫濕度：實(shí)驗(yàn)環(huán)境需控制在21℃±2℃、濕度50%±20% RH，開放式TEWL設(shè)備需額外注意氣流干擾。

- 接收介質(zhì)維護(hù)：接收液需恒溫（32℃）并定期補(bǔ)充（如每次取樣后補(bǔ)充等體積生理鹽水），避免體積變化影響濃度梯度。

3. 藥物施加與取樣規(guī)范

- 貼劑需裁剪為固定直徑（如14mm），確保與皮膚接觸無褶皺；半固體制劑應(yīng)均勻涂抹，避免局部濃度過高。

- 取樣時(shí)間點(diǎn)需覆蓋藥物滲透動(dòng)力學(xué)全過程（如1、2、4、6、8、12、24小時(shí)），并記錄每次取樣后的介質(zhì)補(bǔ)充量。

三、數(shù)據(jù)可靠性與法規(guī)符合

1. 生物等效性驗(yàn)證

- 仿制藥需通過IVPT與原研藥比較累積滲透量（Q）和滲透速率（J），需滿足90%置信區(qū)間在80%-125%內(nèi)。例如，利斯的明貼劑研究中，皮膚電阻抗差異顯著影響滲透量，需通過篩選皮膚電阻范圍減少變異性。

2. 皮膚殘留藥物檢測

- 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需剝離角質(zhì)層（如膠帶剝離法）或橫切皮膚分層測定藥物含量，評(píng)估局部駐留與系統(tǒng)暴露量。但需注意膠帶剝離可能因粘合劑干擾藥物提取。

3. 審計(jì)追蹤與數(shù)據(jù)管理

- 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)需存儲(chǔ)于具備審計(jì)追蹤功能的系統(tǒng)，記錄操作日志與溫度曲線，確保數(shù)據(jù)不可篡改并支持CDE發(fā)補(bǔ)要求。

四、常見風(fēng)險(xiǎn)與規(guī)避措施

1. TEWL測量誤差

- 不同品牌經(jīng)皮水分散失（Trans Epidermal Water Loss, TEWL）設(shè)備因探頭設(shè)計(jì)差異可能導(dǎo)致結(jié)果偏差。建議統(tǒng)一設(shè)備品牌，并通過增加探測器與液面高度校準(zhǔn)（線性負(fù)相關(guān)，R²＞0.9）。

2. 皮膚分層分析局限性

- 組織切片法可能因皮膚層界面不平整導(dǎo)致分層誤差，推薦結(jié)合膠帶剝離與HPLC檢測，提高表皮層藥物定量準(zhǔn)確性。

3. 法規(guī)動(dòng)態(tài)關(guān)注

- 需持續(xù)跟蹤CDE《局部起效化學(xué)仿制藥IVPT研究技術(shù)指導(dǎo)原則》等更新，例如2024年征求意見稿強(qiáng)調(diào)需論證皮膚完整性測試方法的適用性。

IVPT的成功實(shí)施依賴于皮膚模型的標(biāo)準(zhǔn)化、設(shè)備精準(zhǔn)度、環(huán)境控制及數(shù)據(jù)合規(guī)性管理。選擇巴馬香豬皮膚、結(jié)合TEWL與電阻抗法驗(yàn)證完整性、使用自動(dòng)化擴(kuò)散系統(tǒng)可顯著提升實(shí)驗(yàn)效率與結(jié)果可靠性。此外，跨學(xué)科合作（如藥代動(dòng)力學(xué)與皮膚生理學(xué)）是優(yōu)化經(jīng)皮給藥制劑研發(fā)的關(guān)鍵。

附：北京元森凱德生物技術(shù)有限公司研制生產(chǎn)的動(dòng)物霧化吸入給藥儀器，主要包括大/小動(dòng)物肺部氣管直接遞送裝置（動(dòng)物氣道霧化針）、動(dòng)物口鼻吸入、僅鼻腔給藥、全身式暴露染毒、動(dòng)物煙氣/PM2.5染毒系統(tǒng)、粉塵氣溶膠發(fā)生器、臭氧動(dòng)物暴露裝置、動(dòng)物高低壓氧艙，此外給客戶多樣化提供自動(dòng)型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物an'lesi系統(tǒng)（窒息系統(tǒng)、二氧化碳安樂處死箱），實(shí)驗(yàn)動(dòng)物除臭暫存系統(tǒng)，巴馬香豬皮，NGI Gentle Rocker智能洗盤裝置，NGI新一代撞擊器和ACI安德森撞擊器的校驗(yàn)與檢測。

附：北京元森凱德生物技術(shù)有限公司（BEIJING YSKD BIO-TECHNOLOGY CO.,LTD），簡稱元森凱德（YSKD），2013年成立于北京中關(guān)村科技園，是一家專業(yè)從事生命科學(xué)類實(shí)驗(yàn)儀器研制、生產(chǎn)與銷售的科技創(chuàng)新型企業(yè)。服務(wù)毒理學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué)、生物安全、大氣污染物、化學(xué)物質(zhì)毒性鑒定、臨床前藥物開發(fā)與安全性評(píng)價(jià)、呼吸系統(tǒng)、環(huán)境與健康等領(lǐng)域。

部分用戶案例：哈佛大學(xué)，麻省理工學(xué)院，新加坡國立大學(xué)，瑞士蘇黎世聯(lián)邦理工學(xué)院，中國科學(xué)院上海藥物研究所，中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所，麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司，康龍化成（寧波）生物醫(yī)藥有限公司，中日醫(yī)院呼吸病學(xué)研究中心/中日友好臨床醫(yī)學(xué)研究所，北京中醫(yī)藥大學(xué)，中國藥科大學(xué)，沈陽藥科大學(xué)，復(fù)旦大學(xué)，浙江大學(xué)，四川大學(xué)，中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院等