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靶點科技(北京)有限公司

抗體寡核苷酸偶聯(lián)AOC技術(shù)的基礎(chǔ)研究應(yīng)用

時間:2023-5-28閱讀:1488

藥物開發(fā)領(lǐng)域里,寡核苷酸已經(jīng)廣泛應(yīng)用于靶向基因治療的研究。自2018年1月起FDA已批準多款產(chǎn)品上市,早期批準的產(chǎn)品以皮下和靜脈內(nèi)給藥為主,皮下施用的Kynamro利用寡核苷酸在肝臟和腎臟中積累的趨勢;靜脈內(nèi)給藥的Exondys 51利用杜氏肌營養(yǎng)不良患者肌肉細胞攝取增加的趨勢。


基礎(chǔ)研究中,低豐度蛋白怎樣能進行精確和有效檢測?抗體-寡核苷酸 (Ab-oligo) 偶聯(lián)物技術(shù),是一個不錯的選擇,現(xiàn)已被用于從診斷到治療的眾多應(yīng)用中。Ab-oligo 偶聯(lián)物在強化多項生物技術(shù)方面發(fā)揮著重要作用,這些技術(shù)包括免疫學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究、生物標志物的發(fā)現(xiàn)、臨床診斷(包括即時護理)及其他新型技術(shù)。因為寡核苷酸具有多個官能團,所以抗體可以通過氨基酸殘基輕松地與寡核苷酸偶聯(lián),因此適用于大多數(shù)體外應(yīng)用。


抗體-寡核苷酸偶聯(lián)物應(yīng)用

1.免疫聚合酶鏈反應(yīng) (immuno-PCR)

與 ELISA 類似,免疫 PCR 也是一項利用抗體檢測和定量混合樣本中特定抗原(分析物) 的強大技術(shù)。但是,在免疫 PCR 中,Ab-oligo 偶聯(lián)物會與固定分析物結(jié)合,然后通過 RT-PCR 使附著的 DNA 擴增。

在免疫 PCR 中使用 Ab–oligo 偶聯(lián)物,可以提高蛋白檢測和定量的靈敏度;由于它融合了抗體的檢測特異性RT-PCR 的核酸檢測靈敏度,因此明顯優(yōu)于一般的 ELISA 法。20 多年來,將免疫檢測與 RT-PCR 進行結(jié)合已成為一項標準技術(shù)。

由于免疫 PCR 具有強大的擴增能力,而且特異性和靈敏度更高,高出 ELISA 100-10,000 倍,因此檢測的下限更低,擴增產(chǎn)物可以通過凝膠電泳進行觀察,從而確定結(jié)合分析物是否存在。

2.多重檢測開發(fā)

多重蛋白檢測有助于定量使用通用捕獲技術(shù)同時測定多個樣本中的多種目標分析物,從而減少工作流程和樣本量問題。但是,這種檢測方法受到檢測特異性、靈敏度和通量等因素的限制。

開展多重免疫檢測的方法有很多,大致可分為兩類:在固體表面固定,每種分析物在獨立的空間內(nèi)進行檢測;固定于磁珠或顆粒上,每種分析物在不同的磁珠/顆粒上進行檢測。如今,多重蛋白檢測技術(shù)利用 DNA 兩條互補鏈之間的特異性結(jié)合,將每種同源物對應(yīng)的一條鏈(分析物)固定在固體支持物上,例如微量滴定板。將 Ab-oligo 偶聯(lián)物合并,并與孔內(nèi)的特定固定捕獲寡核苷酸雜交,從而創(chuàng)建抗體陣列。


MajicLink oligo-antibody conjugation Kit寡核苷酸偶聯(lián)試劑盒的特點和優(yōu)勢:

-反應(yīng)迅速、操作簡單,30 分鐘即可激活抗體和寡核苷酸,1 小時即可完成寡核苷酸偶聯(lián),無需具備專業(yè)科學(xué)知識,省時省力

-清潔程序穩(wěn)定、靈活(適用于抗體片段和其他蛋白),抗體或者蛋白均可

-抗體和寡核苷酸回收率高,可幫您節(jié)省寶貴的試劑

-單向化學(xué),消除了交聯(lián)的風險

-共價鍵形成的偶聯(lián)物高度穩(wěn)定

-適用于含 10-120 個堿基對的單鏈寡核苷酸,含多達 80 個堿基對的雙鏈寡核苷酸

-連接化學(xué)發(fā)生在 5' 端和 3' 端的末端,可以與其他修飾結(jié)合


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