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免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析（IP-MS）原理

 

免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析（IP-MS）原理介紹：

蛋白質(zhì)相互作用（Protein-Protein Interactions, PPIs）和翻譯后修飾（Post-Translational Modifications, PTMs）的數(shù)據(jù)是能顯著提高基礎(chǔ)類研究文章檔次的主要內(nèi)容。篩選和發(fā)現(xiàn)目的蛋白（target）在細(xì)胞中新的互作蛋白或者新的后修飾，免疫沉淀（IP，Immunoprecipitation）結(jié)合LC-MS（液相色譜-質(zhì)譜連用，蛋白質(zhì)組學(xué)研究的核心工具）是目前的主流技術(shù)方案（IP-MS）。通過一次IP-MS實(shí)驗(yàn)，能高通量的鑒定和篩選到多個與要研究的目的蛋白（target）存在相互作用的蛋白質(zhì)（蛋白質(zhì)復(fù)合物組分），從而擁有屬于自己的專屬蛋白質(zhì)相互作用數(shù)據(jù)庫，通過深入的生物學(xué)功能與分子機(jī)制的分析，能發(fā)表多篇連續(xù)性的學(xué)術(shù)文章。

免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析（IP-MS）應(yīng)用領(lǐng)域：

免疫沉淀和質(zhì)譜聯(lián)用(IP-MS)，可用來確認(rèn)抗體與預(yù)期靶標(biāo)的特異性相互作用。在現(xiàn)有的抗體驗(yàn)證方法中，這種方法的特別之處在于可以主動識別和定量純化自樣本的實(shí)際抗體靶標(biāo)。與其他評估抗體特異性的技術(shù)（如，通過對基因敲除小鼠來源樣本進(jìn)行免疫印跡染色，確定某個消失的條帶）不同，質(zhì)譜法可以直接確定來源于樣本蛋白的肽段序列。因此，IP-MS是確認(rèn)抗體與預(yù)期靶標(biāo)直接結(jié)合的較好方法。