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毛細管電泳儀的故障排除

閱讀:1524      發(fā)布時間:2023-5-31
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毛細管電泳分離的檢測原理基于被測組分和背景電解質(zhì)的吸光度不同,當被測組分通過檢測窗時,吸光度發(fā)生的變化服從朗伯-比爾定律,即在定的實驗條件下,吸光度與被測組分的濃度成正比。

故障排除:

一、無電泳峰:

1、檢查結(jié)果:沒有電流。

可能原因:毛細管堵塞或斷裂。

解決方案:用水沖洗毛細管,觀察是否有水流出。若無水流出,拆下卡盒檢查毛細管兩端和窗口是否斷裂。若毛細管沒斷裂,可用水反向高壓沖洗。緩沖液需過濾,將樣品過濾或離心去除其中的顆粒。

2、檢查結(jié)果:電流波動很大,甚至幾乎消失。

可能原因:緩沖液中有氣泡產(chǎn)生或區(qū)帶中樣品析出。

解決方案:將緩沖液超聲脫氣,如果還有此現(xiàn)象發(fā)生,則可能是區(qū)帶中樣品析出,可降低樣品濃度。對于在緩沖液中溶解度不高的樣品,需在緩沖液中加入添加劑。

3、檢查結(jié)果:電流初始值較小,后逐漸增大。

可能原因:樣品進樣量過大。

解決方案:減少進樣量。

二、電泳峰拖尾:

1、可能原因:毛細管窗口未開或窗口位置不正。

解決方案:打開毛細管檢測窗口或調(diào)整窗口位置。

2、可能原因:樣品在毛細管內(nèi)壁吸附。

解決方案:對于蛋白質(zhì)和核酸樣品,應(yīng)盡量采用涂層毛細管、pH條件或動態(tài)涂層,防止樣品吸附。

 

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