5
引物與探針的區(qū)別與聯(lián)系介紹
一、探針是電測試的接觸媒介，為高精密型電子五金元器件。
二、原理作用：
1.探針是一小段單鏈DNA或者RNA片段(大約是20到500bp)，用于檢測與其互補的核酸序列。雙鏈DNA加熱變性成為單鏈，隨后用放射性同位素(通常用磷-32)、熒光染料或者酶(如辣根過氧化物酶)標記成為探針。磷-32通常被摻入組成DNA的四種核苷酸之一的磷酸基團中，而熒光染料和酶與核酸序列以共價鍵相連。
2.當將探針與樣品雜交時，探針和與其互補的核酸(DNA或RNA)序列通過氫鍵緊密相連，隨后，未被雜交的多余探針被洗去。最后，根據(jù)探針的標記物種類，可進行放射自顯影、熒光發(fā)光、酶聯(lián)化學(xué)發(fā)光等方法來判斷樣品中是否，或者何位置含有被測序列(即與探針互補的序列)。
三、區(qū)別與聯(lián)系：
1.引物設(shè)計的用途:用于PCR擴增技術(shù)。引物設(shè)計的實質(zhì)是—小段單鏈DNA或RNA,在核酸合成反應(yīng)時，作為每個多核苷酸鏈進行延伸的出發(fā)點而起作用的多核苷酸鏈。
2.探針設(shè)計的用途:用于標記待定的核苷酸片斷，用與特異性地、定量地檢測核酸的量。探針設(shè)計的實質(zhì)是在紫外-可見-近紅外區(qū)有特征熒光，并且其熒光性質(zhì)(激發(fā)和發(fā)射波長、強度、壽命、偏振等)可隨所處環(huán)境的性質(zhì)，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。