詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬瘟病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Classical Swine Fever Virus(CSFV)RTPCR
貨號:YS30579-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
具有下列特點(diǎn):
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個(gè)數(shù)量級,可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3. 電泳檢測時(shí),切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
p63 antibody [4A4]原裝、分裝彈性蛋白酶(豬胰)/彈性硬朊酶
Tyrosinase antibody [T311]原裝、分裝普魯蘭酶/聚麥芽三糖酶
Native Carcino Embryonic Antigen CEA protein原裝、分裝腸激酶/腸胨酶/腸蛋白酶
CSK antibody原裝、分裝門冬酰胺酶/門冬酰氨酶/L-天冬酰胺酶
MTA1 antibody原裝、分裝微晶纖維素/纖維素/纖維素粉
BAG2 antibody原裝、分裝DEAE纖維素DE-52/二氨基基纖維素52
Recombinant Cow Prion protein PrP原裝、分裝葡聚糖凝膠G-10/交聯(lián)葡聚糖凝膠G-10
Cytokeratin antibody [MNF116]原裝、分裝葡聚糖凝膠G-200/交聯(lián)葡聚糖凝膠G-200
Cytokeratin 8 antibody [35bH11]原裝、分裝DEAE葡聚糖凝膠A-25Recombinant human BTK protein原裝、分裝醇(for HPLC,≥99.9%)
Recombinant human JAK2 protein原裝、分裝醇(農(nóng)殘級, ≥99.9%)
Recombinant human JAK2 protein原裝、分裝醇(LC-MS,≥99.9%)
Recombinant human PYK2 protein原裝、分裝二十酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC))
Recombinant human HDAC2 protein原裝、分裝基異基(for HPLC,≥99.5%)
Recombinant HDAC3+NCOR2 complex protein原裝、分裝基異基(for HPLC,≥99.5%)
Recombinant human HDAC6 protein (Active)原裝、分裝異醇(農(nóng)殘級,99.9%)
Recombinant Human HDAC8 protein原裝、分裝異醇(農(nóng)殘級,99.9%)
Histone H3 peptide原裝、分裝石油醚(for GC,用于環(huán)境分析)
豬瘟病毒PCR檢測試劑盒ATG16L2 antibody原裝、分裝人巨細(xì)胞病毒pp65(495-503)
Wnt3a antibody [3A6]原裝、分裝人卵泡促性腺激素釋放肽
FAM91A1 antibody原裝、分裝人生長激素(1-43)
SMARCD1 antibody原裝、分裝人免疫球蛋白E五肽(HEPP)
SMARCD2 antibody原裝、分裝人乳頭瘤病毒E7蛋白(49-57)
FBXO42 antibody原裝、分裝靶標(biāo),人
TRIM22 antibody原裝、分裝海德林1
6X His tag® antibody [AD1.1.10] (Alkaline Phosphatase)原裝、分裝海德林1’
IDH1 antibody原裝、分裝海德林2
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。