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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
馬鼻肺炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：馬鼻肺炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書
英文名稱：Equine Rhinopneumonitis Virus（ERV）PCR
貨號(hào)：YS30742-R
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
相對(duì)定量分析方法 ：
2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
具有下列特點(diǎn)：
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個(gè)數(shù)量級(jí)，可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
注意事項(xiàng)：
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織，若為長(zhǎng)期冷凍組織，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解，影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間，也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。
3. 電泳檢測(cè)時(shí)，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以內(nèi)，以便擴(kuò)增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Goat F(ab')2 Rat IgG - Fc (Biotin), pre-adsorbed原裝、分裝WAKO 61660-30-8 食品添加檢測(cè)
Goat F(ab')2 Rat IgG - Fc (HRP), pre-adsorbed原裝、分裝WAKO 374784-31-3 食品添加檢測(cè)
Goat F(ab')2 Rat IgG - Fc (AP), pre-adsorbed原裝、分裝wako 6552-12-1 MPP Oxon Standard
Goat F(ab')2 Rat IgG - Fc (PE), pre-adsorbed原裝、分裝6552-13-2 MPP Oxon Sulfoxide Standard
MUC1 antibody [E29]原裝、分裝wako 67-63-0 2-Propanol 子起生物
Goat F(ab')2 Rat IgG - (Fab)'2, pre-adsorbed原裝、分裝7722-76-1 Ammonium Dihydrogenphosphate
Goat F(ab')2 Rat IgG - (Fab')2 (FITC), pre-adsorbed原裝、分裝wako 141-78-6 Ethyl Acetate 子起生物
Goat F(ab')2 Rat IgG - (Fab)'2 (TR), pre-adsorbed原裝、分裝wako 151-21-3 Sodium Dodecyl Sulfate
Goat F(ab')2 Rat IgG - (Fab)'2 (TRITC ), pre-adsorbed原裝、分裝wako 7757-82-6 Sodium SulfateCaMKII alpha antibody原裝、分裝N-苯酰-L-酪氨酯(BTEE)
HDAC7 antibody [HDAC7-97]原裝、分裝N-苯酰-L-酪氨酯(BTEE)
Recombinant human IGFBP1 protein原裝、分裝AEBSF絲氨抑制
Recombinant human IGFBP1 protein原裝、分裝AEBSF絲氨抑制
Recombinant Human Resistin protein原裝、分裝AEBSF絲氨抑制
Recombinant Human Resistin protein原裝、分裝AEBSF(進(jìn)分)
Recombinant human Adiponectin (gAcrp30/Adipolean Variant) protein原裝、分裝鹽貝他定(進(jìn)口)
Recombinant human Adiponectin (gAcrp30/Adipolean Variant) protein原裝、分裝鹽貝他定(進(jìn)口)
Recombinant human Adiponectin protein原裝、分裝鄰菲啰啉鹽鹽，一水
馬鼻肺炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書DHX30 antibody原裝、分裝水楊苯酯(>98%,BR)
Recombinant human Dystrophia myotonica protein kinase / DMPK原裝、分裝標(biāo)準(zhǔn)載量苯基疏水色譜柱料
Recombinant human Dystrophia myotonica protein kinase / DMPK原裝、分裝標(biāo)準(zhǔn)載量苯基疏水色譜柱料
Recombinant human DCLK2 protein原裝、分裝脂酶A2
Recombinant human DCLK2 protein原裝、分裝亞(>98%，BC)
Recombinant human CLK3 protein原裝、分裝鄰苯二酰亞胺(>98%,BR)
Recombinant human CLK3 protein原裝、分裝對(duì)尼泊金酯鈉(>98%,USP)
Zinc finger protein 276 antibody原裝、分裝尼泊金酯鈉(>98.5%,BR)
Thrombospondin 1 antibody原裝、分裝尼泊金酯鈉(>99%,BR)
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。