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相對定量分析方法  ：
2-ΔΔCt
前提：目標序列和內(nèi)參序列的擴增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
 1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標基因的CT值：
   ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
   ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
 2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值：
        ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
 3、計算表達水平比率：
                   2 –ΔΔCT=表達量的比值


參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：貓細小病毒PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱：Feline Parvovirus(FPV)PCR
貨號：YS30767-R
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

使用方法:

一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

具有下列特點：
1.根據(jù) 指標的保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級，可以達到幾百拷貝/反應。
3.即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡單，定量準確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。

Sheep Rabbit IgG H&L (FITC)原裝、分裝84624-17-9 | Fmoc-D-Val-OH|南京肽業(yè)

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Donkey Rabbit IgG H&L (HRP)原裝、分裝鈉DDB2 antibody [2246C4a]原裝、分裝木聚糖酶

ARID2 antibody [2036C1a]原裝、分裝透明質(zhì),玻尿(分子量80萬-150萬)

PLCG 2 (phospho Y759) antibody [EP1406Y]原裝、分裝透明質(zhì),玻尿(分子量80萬-150萬)

PLCG 2 (phospho Y759) antibody [EP1406Y]原裝、分裝透明質(zhì),玻尿,醣（分子量3K）

PLCG 2 (phospho Y759) antibody [EP1406Y]原裝、分裝透明質(zhì),玻尿,醣（分子量3K）

SIRT2 antibody [EP1668Y]原裝、分裝透明質(zhì),玻尿,醣（分子量10K）

SIRT2 antibody [EP1668Y]原裝、分裝透明質(zhì),玻尿,醣（分子量10K）

SIRT2 antibody [EP1668Y]原裝、分裝透明質(zhì),玻尿,醣（分子量90K）

TAF6 antibody [585D4a]原裝、分裝透明質(zhì),玻尿,醣（分子量90K）
貓細小病毒PCR檢測試劑盒說明書FOG1 antibody原裝、分裝特泯菌

Human ERGIC2/PTX1 peptide原裝、分裝二氯化錫二水(>98%,BR)

POU6F2 antibody原裝、分裝草亞錫(>98%,BR)

RhoA antibody原裝、分裝四氯化錫五水(>98%,BC)

NF-kB p65 (phospho S536) antibody原裝、分裝二氧化錫(> 99%,BR)

VPS4B/MIG1 antibody原裝、分裝亞鈦(>98%,BR)

U2AF35/U2AF1 antibody原裝、分裝氯化鈦（IV）溶液

TOR1AIP1 antibody原裝、分裝鈦(>96%,BR)

Perforin antibody [B-D48], prediluted (FITC)原裝、分裝硼三酯(>98%,BR)

注意事項：
1. 建議使用新鮮采取的動物組織，若為長期冷凍組織，應盡量避免反復凍融，否則會導致模板的降解，影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產(chǎn)生沉淀。在使用前務必將其在室溫中放置一段時間，也可在37℃水浴中預熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。
3. 電泳檢測時，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶，影響實驗結果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nèi)，以便擴增效率佳。
5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。