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基因?qū)雰x是怎樣進(jìn)行工作的？
閱讀：1074 發(fā)布時(shí)間：2022-1-19
基因?qū)雰x是生物領(lǐng)域研究中的一種常用的儀器。該設(shè)備整機(jī)一體化設(shè)計(jì)，操作簡(jiǎn)單，顯示直觀，微處理器控制的脈沖放電采用人機(jī)對(duì)話界面，操作簡(jiǎn)單、直觀、細(xì)化了電容、電阻的設(shè)定范圍，使細(xì)胞的電穿孔實(shí)驗(yàn)在相關(guān)條件下有了更廣泛的選擇。廣泛應(yīng)用于各種動(dòng)物、植物細(xì)胞和微生物的電穿孔，也可作細(xì)胞雜交、融合、基因?qū)氲难芯俊?br />
基因?qū)雰x的工作原理：
采用細(xì)胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn))的原理，也叫細(xì)胞電穿孔(electroporation)，是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)部的重要方法。在瞬間強(qiáng)大電場(chǎng)的作用下，溶液中細(xì)胞的細(xì)胞膜具有了一定的通透性，帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進(jìn)入細(xì)胞膜。由于細(xì)胞膜磷脂雙分子層的電阻很大，細(xì)胞外部電流場(chǎng)產(chǎn)生的細(xì)胞兩極電壓都被細(xì)胞膜承受，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計(jì)，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒(méi)有電流，因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過(guò)程中細(xì)胞毒性很小。電場(chǎng)使DNA等物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞膜后只能停止在細(xì)胞膜附近，隨后細(xì)胞本身的機(jī)制可以允許這些物質(zhì)到細(xì)胞核等處。由于電轉(zhuǎn)技術(shù)依靠的是物理方法，細(xì)胞表面的分子特性對(duì)電轉(zhuǎn)影響比較小。相比化學(xué)轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法，電轉(zhuǎn)可以用在所有的細(xì)胞種類上，而且容易定量控制。
儀器若長(zhǎng)期末使用在重新使用時(shí)，應(yīng)先低壓充電、放電，逐步升高電壓，直至額定值。在儀器使用時(shí),應(yīng)先通電予熱10 -15min設(shè)置數(shù)據(jù)，進(jìn)行幾次充電放電空操作后才可正式進(jìn)行導(dǎo)入操作。