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基因?qū)雰x是怎樣進行工作的?

閱讀:1078        發(fā)布時間:2022-1-19
  基因?qū)雰x是生物領(lǐng)域研究中的一種常用的儀器。該設備整機一體化設計,操作簡單,顯示直觀,微處理器控制的脈沖放電采用人機對話界面,操作簡單、直觀、細化了電容、電阻的設定范圍,使細胞的電穿孔實驗在相關(guān)條件下有了更廣泛的選擇。廣泛應用于各種動物、植物細胞和微生物的電穿孔,也可作細胞雜交、融合、基因?qū)氲难芯俊?br />
  基因?qū)雰x的工作原理:
  采用細胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn))的原理,也叫細胞電穿孔(electroporation),是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導入細胞膜內(nèi)部的重要方法。在瞬間強大電場的作用下,溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細胞外部電流場產(chǎn)生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受,細胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計,細胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質(zhì)進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,隨后細胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細胞核等處。由于電轉(zhuǎn)技術(shù)依靠的是物理方法,細胞表面的分子特性對電轉(zhuǎn)影響比較小。相比化學轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法,電轉(zhuǎn)可以用在所有的細胞種類上,而且容易定量控制。
  儀器若長期末使用在重新使用時,應先低壓充電、放電,逐步升高電壓,直至額定值。在儀器使用時,應先通電予熱10 -15min設置數(shù)據(jù),進行幾次充電放電空操作后才可正式進行導入操作。

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