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簡單介紹透射電鏡的制樣流程

閱讀:1240        發(fā)布時間:2023/2/20
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    透射電鏡是一種高分辨率、高放大倍數(shù)的顯微鏡,是材料科學研究的重要手段,能提供極微細材料的組織結構、晶體結構和化學成分等方面的信息。透射電鏡的分辨率為0.1~0.2nm,放大倍數(shù)為幾萬~幾十萬倍。透射電鏡由電子光學系統(tǒng)、真空系統(tǒng)和電子學系統(tǒng)三大部分組成。
  透射電鏡制樣流程:
  組織取材(60s內),體積<1mm3,之后進行如下步驟:
  1、前固定:3%戊二醛2h或過夜。
  2、漂洗:磷酸緩沖液,3次,10min/次。
  3、后固定:1%鋨酸固定液,2h。
  4、漂洗:(同上)。
  5、梯度脫水:50%丙酮,70%丙酮,80%丙酮,90%丙酮兩次,各
  10min。100%丙酮兩次,各15min。
  6、滲透:丙酮/包埋劑(1:1,1:2),室溫各1h。丙酮/包埋劑1:3,4度過夜。純包埋劑,4度過夜。
  7、包埋:純包埋劑(37度,45度,60度各24h)。取出包埋塊,進行超薄切片,片厚70nm。分別采用醋酸雙氧鈾對切片進行染色30min,雙蒸水漂洗3-5次,之后用檸檬酸鉛染色10min,雙蒸水漂洗3-5次。待切片干燥后,透射電鏡觀察。
  隨著科技的發(fā)展,人們對透射電鏡的使用要求越來越高,透射電鏡仍在不斷發(fā)展。

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