微生物鑒定藥敏分析儀原理
微生物鑒定藥敏分析儀原理
各種病原菌主要是真菌、腸球菌屬、革蘭氏陽性菌及革蘭氏陰性菌等可以通過微生物鑒定和藥敏分析儀器鑒定出來,而且該儀器還能夠同時做抗菌藥物敏感性試驗從而對臨床醫(yī)生作出正確的病原學診斷并制定治療方法有所幫助。
全自動微生物鑒定和藥敏分析類儀器與自動化、微機化以及*的微生物檢驗方法相結(jié)合,能夠同時做細菌鑒定和藥敏試驗,可以在臨床上對大多數(shù)細菌進行快速鑒定和藥敏實驗。
細菌鑒定原理:
使用傳統(tǒng)的比色法和快速熒光法。不同的測試卡是以不同類別細菌的理化性質(zhì)不同為依據(jù)設(shè)計的,每一張卡包含多項生化反應。因為細菌生長利用底物而引起的透光度變化或者細菌因分解底物造成PH值改變都能夠使用儀器通過光電比色法來進行測定。在測試卡的小孔中加入酶底物,讓它和細菌產(chǎn)生的酶相結(jié)合,這就是熒光法。儀器可以在較短的時間內(nèi)對細菌結(jié)合不同生化底物所產(chǎn)生的發(fā)熒光的物質(zhì)進行分析,細菌胞外酶是由讀數(shù)器測定熒光強度來判定。使用熒光技術(shù)鑒定細菌的速度能夠提高4- 8倍。兩個小時以內(nèi)能夠得出鑒定報告。細菌鑒定有多種不同類型的實驗底物。使用的測試卡和試劑與使用的儀器的品牌是互相對應的。顯色底物和熒光底物都屬于以酶為基礎(chǔ)的反應底物。糖類底物和化合物底物都屬于以微生物生長為基礎(chǔ)的底物。糖類底物和化合物底物,還有混合底物屬于以微生物生長為基礎(chǔ)的底物其這些底物由于與各種細菌發(fā)生氧化、降解及水解反應,產(chǎn)生熒光物質(zhì)或者顏色的變化,細菌的菌型通過顯色和熒光強度的變化來鑒定。儀器會自動選擇底物進行分析。
藥敏試驗方法:
藥敏試驗有比濁法和熒光測定法兩種測定方法。以藥敏試驗的判讀標準為依據(jù)。 每一種藥物設(shè)計了多個稀釋梯度,每一種抗生素可以用3- 8個測試孔來對Zdi抑菌濃度進行測定,將一定濃度的菌懸液加入到孔中。為了方便對不同細菌配置菌懸液的濃度進行測定,系統(tǒng)配有專用光電比濁儀??變?nèi)微生物生長形成的小顆粒或聚集成的團塊會導致濁度變化,各個測試孔的濁度變化是由儀器采用光電比濁法進行測定,每隔一定時間讀取數(shù)據(jù)一次,讀數(shù)器測得的吸光度值會有差異,從而使得待檢菌在不同濃度藥液及不同藥物中的生長率能夠被獲取。在含有各種濃度的抗生素的反應卡中,加入待測細菌的菌懸液,經(jīng)過一定時間孵育后使用光電比濁法對其透光率進行測定,獲取其吸光度值,如果細菌生長,濁度就會增加,吸光度值就會增大,說明細菌不會被該孔內(nèi)的抗生素所抑制,相反就表明該孔內(nèi)的抗生素能夠抑制細菌,該種抗生素對此菌的MIC值是指用Z小的藥物濃度依然可以對細菌的反應孔進行抑制。使用熒光技術(shù)測定時,將熒光底物加入到肉湯中,大多數(shù)菌種的MIC值均可以在5小時內(nèi)判讀出來并且能夠依據(jù)相應標準報告其藥物敏感結(jié)果( S、I、R) 。MIC卡每種藥物都有多個稀釋度,儀器在每讀取一次數(shù)值后會自動比較所測取的數(shù)據(jù)與存儲在硬盤中的菌種資料庫標準菌生物模型,然后經(jīng)過電腦分析得出鑒定的結(jié)構(gòu),報告能夠通過打印機打印出來。微生物鑒定藥敏分析儀原理
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