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流式細(xì)胞儀的原理特征

閱讀:1699      發(fā)布時間:2021-3-8
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  流式細(xì)胞儀原理:
 
  流式細(xì)胞儀能“看到”的物體大小是微米級的細(xì)胞或顆粒,波長范圍多在可見光范圍內(nèi)。
 
  流式細(xì)胞儀的原理,簡而言之就是一定波的激光束直接照射到 高壓驅(qū)動的液流,產(chǎn)生的光信號被多個接收器接收,一個是在激光束直 線方向上接收到的前向角散射光信號,其他的是在激光束垂直方向上 接收到的光信號,包括側(cè)向角散射光信號和熒光信號。液流中懸浮的 細(xì)胞能夠使激光束發(fā)生散射,而細(xì)胞上結(jié)合的熒光素被激光激發(fā)后能 夠發(fā)射波長高于激發(fā)光的熒光,散射光信號和熒光信號被相應(yīng)的接收 器掊收后,根據(jù)接收到信號的強(qiáng)弱就能反映出每個細(xì)胞的物理和化學(xué) 特征。
 
  具體來講就是,待測樣本被制備成單個細(xì)胞懸液,將感興趣的部分經(jīng)特異性熒光染料染色,置于流式細(xì) 胞儀的樣品室。經(jīng)樣品管,在氣體的壓力下進(jìn)入流動室。流動室內(nèi)充滿鞘液,在鞘液的約束 下。細(xì)胞排成單列由流動室的噴嘴噴出,成為細(xì)胞液柱。液柱與入射的激光束垂直相交,相交點稱為測量區(qū)。通過測量區(qū)的細(xì)胞被激發(fā)產(chǎn)生熒光。在與入射光束和液柱垂直的方向放置透鏡、反射鏡、濾光片等光學(xué)元件和檢測器,用以收集散射光信號以及熒光信號。被收集的熒光信號經(jīng)電子電路處理放大后,輸人計算機(jī)。經(jīng)計算機(jī)處理,得出可以判讀到該檢測樣本 性質(zhì)、數(shù)量的數(shù)字信息。

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