ELISA檢測樣本的處理

時間：2023/10/12閱讀：1034

在收集標本前需有一個完整的計劃，需要清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。ELISA檢測提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進行檢測的標本，及時儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮?，請取材后，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質(zhì)量，所以避免反復凍融。

◇ 液體類標本：

包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

◇ 血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

◇ 血漿：

應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

◇ 尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

◇ 細胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

◇ 組織標本：

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

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ELISA檢測樣本的處理

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