NaOH/SDS溶液 核酸類

產(chǎn)品貨號：T11027

產(chǎn)品規(guī)格：2×100ml/2×500ml

產(chǎn)品簡介：

 堿裂解法是常用的小量制備質(zhì)粒DNA的方法，可用于抽提微克級別的質(zhì)粒DNA。葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)、NaOH/SDS溶液和乙酸鉀溶液(5mol/L,pH4.8)是其常用試劑。NaOH/SDS溶液由NaOH溶液和SDS溶液等組成，臨用前等量混合使用，溶液呈堿性，是堿裂解法提DNA的重要成分。其原理是：當(dāng)菌體在NaOH和SDS溶液中裂解時，蛋白質(zhì)與DNA發(fā)生變性，加入中和液（乙酸鉀溶液）后，質(zhì)粒DNA分子迅速復(fù)性，呈溶解狀態(tài)，離心時留在上清中，由于蛋白質(zhì)和染色體DNA不復(fù)性而呈絮狀，離心時可沉淀下來。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

操作步驟(僅供參考)：

1. 配置 NaOH/SDS 溶液：取 NaOH 溶液和 SDS 溶液等比例混合后使用，宜臨用前配置。

2. 接種一個單菌落于 LB 培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)至飽和狀態(tài)。

3. 取 1.5ml 培養(yǎng)液，10000～12000g 離心 20～60s，棄上清。 

4. 用 100μl 葡萄糖-Tris-EDTA 溶液*重懸沉淀，室溫靜置 5min。 

5. 加入 200μl 新鮮配置的 NaOH/SDS 溶液，顛倒混勻數(shù)次，可在冰上放置 2~5min，使細(xì)胞膜破裂。 

6. 加入 150μl 乙酸鉀溶液，將管溫和顛倒數(shù)次混勻，見白色絮狀沉淀，可在冰上放置 3~5min，此時，質(zhì)量 DNA復(fù)性，染色體和蛋白質(zhì)不可逆變性，形成不可溶復(fù)合物。 

7. 加入 150μl 酚氯仿異戊醇，震蕩混勻，4℃12000r/min 離心 10min。繼續(xù)后續(xù)實驗。

注意事項：

1. NaOH 溶液呈強(qiáng)堿性，請小心操作，如果皮膚接觸，應(yīng)盡快擦干并用流水充分沖洗。 

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期：12個月。

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