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細(xì)胞總蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：26110

產(chǎn)品規(guī)格：50 次／100 次

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

  從細(xì)胞中提取總蛋白是Western Blot的關(guān)鍵步驟。本試劑盒為細(xì)胞總蛋白提取提供完整的解決方案。直接用裂 解-結(jié)合緩沖液重懸培養(yǎng)細(xì)胞，然后加入抽提試劑去除非蛋白成分，離心、干燥后即可得到總蛋白。蛋白沉淀溶 解后用常規(guī)方法進(jìn)行蛋白定量。提取過(guò)程可在30-60分鐘內(nèi)完成，可在1.5ml離心管微量提取也可大規(guī)模制備，極 為簡(jiǎn)便高效。

產(chǎn)品內(nèi)容：

操作步驟：

1. 消化洗滌并 800g 離心收集細(xì)胞，用 PBS 清洗 2 次。

2. 每 5-10×10 6 細(xì)胞加入 0.5m 裂解液，振蕩重懸，4ºC 凈置 20 分鐘。

3. 10,000g 4ºC 離心 5 分鐘，細(xì)胞碎片沉淀在管底。

4. 收集上清，BCA 定量，以備后期 Western 等實(shí)驗(yàn)使用。

注意事項(xiàng)：

  使用前在 5×cell lysis buffer 中加水 20ml 及 0.25ml 的 100×DTT 溶液，于-20ºC 保存。