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蘇木素伊紅(HE)染色液

產(chǎn)品貨號(hào)：S20202

產(chǎn)品規(guī)格：2×100ml

產(chǎn)品簡介：

  蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色，簡稱 HE 染色，是病理學(xué)常規(guī)制片中基本的染色方法， 應(yīng)用極其廣泛。蘇木精是從原產(chǎn)中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結(jié)晶，是一種堿性染色劑，它在 被氧化后生成蘇木素，同媒染劑(常用的是三價(jià)的鋁或鹽鐵)一起使用，能夠使細(xì)胞核染色。在病理診斷、教 學(xué)和科研工作中，常用 HE 染色對(duì)正常組織和病變組織進(jìn)行形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察。對(duì)于確定或鑒別病變組織、細(xì) 胞中出現(xiàn)的某些異常物質(zhì)不特殊成分，而需要采用的特殊染色方法、酶組織化學(xué)方法、免疫組織化學(xué)方法 等也均是在觀察HE 染色組織切片的基礎(chǔ)上進(jìn)行的。在 HE 染色的組織切片中，細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞漿呈 紅色，二者形成鮮明的對(duì)比，易于觀察分析。

  尚寶生物 蘇木素伊紅染色液中，蘇木素染色液采用 尚寶生物 自主研發(fā)的配方，由進(jìn)口的高純度蘇木 精、氧化劑等組成，不含甲醇等有害物質(zhì)，對(duì)細(xì)胞核染色效果好。其特點(diǎn)是不易產(chǎn)生沉淀和金屬; 應(yīng) 用范圍廣，可以用于人、動(dòng)物、畜牧、水產(chǎn)等領(lǐng)域，可以用于組織石蠟切片、冰凍切片和組織細(xì)胞的染色 等；蘇木素染色液可以重復(fù)使用。

染色原理：

1、細(xì)胞核染色的原理：

  蘇木素為堿性天然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是 DNA，在 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu) 中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使 DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易不帶正電荷的蘇木 素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。

2、細(xì)胞漿染色的原理：

  伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料，在一定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì)，為兩 性化合物，細(xì)胞漿的染色不染液的 pH 值密切相關(guān)。當(dāng)染色液 pH 值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7～5.0)以下時(shí)， 胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離，則細(xì)胞漿帶正電荷，就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電 荷的陰離子，不胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合，使細(xì)胞漿著色，呈現(xiàn)紅色。

3、分化作用：

  染色后，用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去，這個(gè)過程稱為分化作用，所用的溶液稱為 分化液。在 HE 染色中常用 1%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使組織不色素分離 而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后，必須用 1%鹽酸乙醇分化，使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進(jìn)行伊紅染色，才能保證細(xì)胞核不細(xì)胞漿染色的分明。

4、返藍(lán)作用：

  分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色；在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，呈藍(lán) 色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，立即用水除去組織切片上的酸而中止分化，再用弱堿性 水使蘇木素染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核 返藍(lán)，但所需時(shí)間較長。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1、鹽酸乙醇分化液

2、藍(lán)化液，如稀氨水、碳酸鋰溶液等

3、系列乙醇

4、4%多聚甲醛

操作步驟:

(一)石蠟切片染色

1、切片脫蠟至水

①二甲苯作用 2 次，每次 5～10min。

②(可選)無水乙醇作用 2 次，每次 3～5min。

③95%的乙醇 3～5min

④90%的乙醇 3～5min

⑤80%的乙醇 3～5min

⑥自來水或蒸餾水 1～3min

2、染色

①蘇木素染色液染色 5～8min

②自來水或蒸餾水沖洗 5～10s

③(可選)鹽酸乙醇分化 2～5s

④自來水沖洗 20～30s

⑤藍(lán)化液返藍(lán) 20～40s

⑥自來水沖洗 30～60s

⑦伊紅染色液染色 3～5min

⑧自來水沖洗 1～5s

2、脫水、透明、封固

①80%乙醇 10～20s

②90%乙醇 10～20s

③95%乙醇作用 2 次，每次 1～2min。

④無水乙醇作用 2 次，每次 2～3min。

⑤二甲苯透明 3 次，每次 2～3min。

⑥中性樹脂封片。

染色結(jié)果：

  細(xì)胞核呈藍(lán)色；細(xì)胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維、甲狀腺膠質(zhì)等呈深淺不一的紅色；角蛋白、紅細(xì) 胞等呈明亮的橙紅色。

(二)冰凍切片染色

1、乙氧基乙烷混合固定液 5～10s

2、自來水沖洗 2～5s

3、蘇木素染色液滴染 1～2min(可加熱至 50℃)。

4、自來水沖洗 2～5s

5、(可選) 鹽酸乙醇分化 2～5s

6、自來水沖洗 2～5s

7、藍(lán)化液返藍(lán) 2～5s

8、自來水沖洗 5～10s

9、伊紅染色液染色 2～5s

10、自來水沖洗 1～2s

11、80%的乙醇 1～2s

12 、95%的乙醇 1～2s

13、無水乙醇 2～5s

14、苯酚二甲苯(1:3) 2～5s

15、二甲苯透明 3 次，每次 2～5s 16、中性樹脂封片

備選方案：

1、無需脫蠟，直接迅速用蒸餾水沖洗 2～3min。

2、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟。

染色結(jié)果：

細(xì)胞核呈藍(lán)色；細(xì)胞質(zhì)、纖維呈紅色。