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多肽固相合成法是多肽合成化學(xué)的一個(gè)重大的突破，其最大特點(diǎn)是不必純化中間產(chǎn)物，合成過程能夠連續(xù)進(jìn)行，從而為多肽合成的自動(dòng)化奠定了基礎(chǔ)。

 

多肽合成儀能夠用于合成各種蛋白質(zhì)與多肽，進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能以及體外相互作用、免疫學(xué)等方面的研究，包括合成漢坦病毒核衣殼蛋白抗原多肽片段以及多肽類藥物的研制。

 

運(yùn)行原理：

 

多肽合成儀以固相合成為反應(yīng)原理，在密閉的防爆玻璃反應(yīng)器中使氨基酸按照已知順序（序列，一般從C端-羧基端 向 N端-氨基端）不斷添加、反應(yīng)、合成，操作最終得到多肽載體。固相合成法，大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。為了防止副反應(yīng)的發(fā)生，參加反應(yīng)的氨基酸的側(cè)鏈都是保護(hù)的。羧基端是游離的，并且在反應(yīng)之前必須活化。固相合成方法有兩種，即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多優(yōu)勢(shì)，現(xiàn)在大多采用Fmoc法合成，但對(duì)于某些短肽，tBoc因其產(chǎn)率高的優(yōu)勢(shì)仍然被很多企業(yè)所采用。

具體合成由下列幾個(gè)循環(huán)組成：

1）去保護(hù)：Fmoc保護(hù)的柱子和單體必須用一種堿性溶劑（piperidine）去 除氨基的保護(hù)基團(tuán)。

2）激活和交聯(lián)：下一個(gè)氨基酸的羧基被一種活化劑所活化。活化的單體與游離的氨基反應(yīng)交聯(lián)，形成肽鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅(qū)使反應(yīng)完成。循環(huán)：這兩步反應(yīng)反復(fù)循環(huán)直到合成完成。

3）洗脫和脫保護(hù)：多肽從柱上洗脫下來(lái)，其保護(hù)基團(tuán)被一種脫保護(hù)劑（TFA） 洗脫和脫保護(hù)。